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檸檬酸(CA)含量可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6574 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
規(guī)格 | 50管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6574 |
商品介紹:
測(cè)定意義
CA又稱(chēng)枸櫞酸,廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中,是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一步反應(yīng)的產(chǎn)物,與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。
測(cè)定原理
酸性條件下,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
ZCWCC1抗體Anti-MT-CO1 AntibodyAMV cDNA *鏈合成試劑盒30 次規(guī)格
鋅指蛋白300抗體Anti-MT-ND4 Antibody接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol規(guī)格
鋅指蛋白ZBTB39抗體Anti-MTA2 Antibody即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒20 次圖片
鋅指蛋白201抗體Anti-MTA1 AntibodyXL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)0.1mL×10圖片
鋅指蛋白Zic2抗體Anti-MTOR AntibodyTuner(DE3) 感受態(tài)0.1mL×10圖片
鋅指蛋白Zdhhc18抗體Anti-MTOR AntibodyLBA4404 農(nóng)桿感受態(tài)10×100μL規(guī)格
鋅指蛋白Zdhhc12抗體Anti-MTDH Antibody(原貨號(hào)PB0309)即用型 PCR 試劑盒 3.09 mL圖片
著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體Anti-MTR Antibody6nt 隨機(jī)引物 ( 抗水解 ),0.5mM100μL圖片
檸檬酸(CA)含量可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒黃草靈Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EREG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
嘧菌酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標(biāo)記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG小鼠α1抗胰蛋白(α1-AT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
嘧菌酯Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標(biāo)記芳香化蛋白抗體IgG小鼠質(zhì)金屬蛋白14(MMP-14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標(biāo)記芳香化/色素P450/P450抗體IgG小鼠膽囊收縮素八肽(CCK-8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
烯唑Anti-ART/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子GDNF的一種抗體IgG小鼠可溶性CD14(sCD14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
環(huán)戊酮-2-羧乙酯 97%Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)母特異性轉(zhuǎn)移因子抗體IgG小鼠免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4(5)-羥咪唑鹽鹽 98%Anti-ASIC1/BNaC2/FITC 熒光素標(biāo)記敏感離子通道1抗體IgG小鼠烯式酮羧激1(PCK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2--4-氧乙 >98.0%(T)Anti-ASK1/MAPKKK5 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗體IgG小鼠平滑肌肌動(dòng)蛋白α2(ACTα2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
多效唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(HPLC)Anti-ASK1(phospho Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠硬骨素(SOST)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
多效唑Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠卵脂膽固酰轉(zhuǎn)移(LCAT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
戊炔草 分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-ASK1(phospho Ser967) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體IgG小鼠III型前膠原氨端原肽(PⅢNP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
炔酰草Anti-ASPP1/FITC 熒光素標(biāo)記p53凋亡激蛋白1抗體IgG小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
硫氫化鈉,水合 68-72 %Anti-ASPP2/FITC 熒光素標(biāo)記P53凋亡激蛋白2抗體IgG小鼠CD163分子(CD163)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二 97%Anti-AT/AGT /FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素原抗體IgG小鼠二肽肽IV(DPP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-()吡鹽鹽 97%Anti-AT1/FITC 熒光素標(biāo)記血管緊張素I抗體IgG小鼠因子受體(EGFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
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