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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>原代細(xì)胞復(fù)蘇流程
原代細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
3.在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
迅速解凍:
1. 迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化,時(shí)間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液:
1. 融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中,2000r/min 或者600g離心2min
2. 吸棄上清液。
3. 用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,吹打制成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
4. 將復(fù)蘇好的原代細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi),8-24小時(shí)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞生長(zhǎng)情況而定。
白細(xì)胞介素-16IgG 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
白細(xì)胞介素18結(jié)合蛋白IgG 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)
白細(xì)胞介素-18受體α鏈IgG 小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
白細(xì)胞介素-18受體β鏈IgG 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)
白細(xì)胞介素-19IgG 小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)
白細(xì)胞介素-20IgG 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)
白細(xì)胞介素27受體IgG 小鼠肝脂酶(HL)
白細(xì)胞介素28AIgG 小鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)
白細(xì)胞介素28BIgG 小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
原代細(xì)胞
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