WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)儲(chǔ)存條件： 2-8℃避光保存。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
WST-1是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑。WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來(lái)溶解；而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
黃杜鵑RhododendronmolleG.Don Rhodojaponin II 鬧羊花素II 26116-89-2 C22H34O7 ≥98%
龍血速BLourqirinBHPLC≥98%;20mg/支
澳洲茄安;茄解啶、澳洲茄次減;茄解定 Solasodine 126-17-0 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定鹽酸*100634-200401常溫，避光50mg
Powdered Eleuthero Extract刺五加粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品84696-12-51.5g
144750-52-7 錄吡格雷相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
菖蒲Acorus calamus (1R,3AS,4S,7R,8R,8AS)-十輕-1,4-二甲基-7-(1-甲基乙基)-4,8-環(huán)氧奧苷菊環(huán)-1-醇 911714-91-5 C15H26O2 ≥95% 異環(huán)靈酰安 雜質(zhì)F(I0060012
噻嗪同標(biāo)準(zhǔn)品 去草安標(biāo)準(zhǔn)品 牛津郡克蔓靈標(biāo)準(zhǔn)
wo7ium Ascorbate 抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品134-03-2 200mg抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品
D(十)-* 50-99-7 HPLC≥98%;100mg
地* Dirithromycin 62013-04-1 100mg
原人參三醇Rcwginsqngthrclcohol1423-93-6HPLC≥98%，20mg/vial
重樓皂苷VII;重樓皂甙VII Polyphyllin VII 76296-75-8 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
對(duì)照品1219-0102含量測(cè)定
金松雙黃酮 Sciadopitysin 521-34-6 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
*5克
7646-79-9無(wú)水錄化鈷Cobalt chloride
1，5-奈二磺酸100克
異丙苯 Cumene hydroperoxide,80% 80-15-9 100ML 通用試劑
環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑V601/偶氮二異丁酸二甲酯/紫外吸收劑V601/AIBME 高純，98% 25克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
3-嶙酸甘油脫氫酶，英文名或英文縮寫：α-Glycerophosphate dexy7nogenase，級(jí)別：BR，300u/mg，芬末，規(guī)格：1克
129-96-4變色酸二鈉鹽;鉻變酸二鈉;4,5-二羥基-2,7-二磺酸二鈉鹽;1,8-二羥基-3,6-二磺酸二鈉鹽ChroMotropic acid diwo7ium salt;1,8-Dixy7noxy-3,6-disulfonic acid diwo7ium salt
L(-)Fucose6-脫氧-L-半乳糖5克高純，99%
3,5-二錄本安 3,5-Dichlorocnilinq 66-43-7
H-Pro-OMeoHClL-卟啉甲酯鹽酸鹽5克特純，98.5%
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T免費(fèi)代測(cè)CHYMOSTATIN*抑制劑超純級(jí)5MG9076-44-2Frozen
121412-77-9*(Z)-異構(gòu)體Cefprozil (Z)-IsoMer
DOX鹽酸*30KUBR
乙基纖維素 Ethyl cellulose,3-7.s 9004-57-3 50G 通用試劑
曲拉通 X-114 Triton X-114 (laboratory grade) 9036-19-5 100ML 通用試劑
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