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中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法儲存條件： -20℃保存。
有效期：一年。
產品簡介：
細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(中性紅法)是利用細胞對中性紅的攝入能力來檢測細胞增殖或細胞毒性。中性紅可以被活細胞所攝入，并在溶酶體中積累。在細胞增殖加快時，細胞數量增多，可以攝入的中性紅的量就會增加。在細胞受到損傷時，中性紅的攝入能力會下降。這樣通過對于中性紅攝入量的不同就可以確定細胞的增殖或毒性。
中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
割舌樹Walsura robusta Richenoic acid none 134476-74-7 C30H48O3 ≥95%
20(R)人參皂苷Rg320(R)ofginsqnosidqRg3HPLC≥98%，20mg/支
菝葜皂苷元; 菝葜皂甙元;知母皂苷元 Sarsasapogenin 82597-74-8：126-19-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材九里香121476-200401TLC法鑒別
(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1)總銀杏酸
1452-94-4 扶尼辛相關化合物C標準品(NA) 50mg
辣椒 Capsicum annuum L. 辣椒減 404-86-4 C18H27NO3 ≥98% 聚迷;泊洛沙姆 2 7(P216020
甲青菊酯標準品 甲壬同標準品 甲霜林標準品
*相關物質B標準品50-45-3 20mg*相關物質B標準品
綿馬貫眾素ABBA 12777-70-7 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
喉藥醉魚草Buddleja paniculata 6-O-Vanilloylajugol 6-O-香草?；罟遣荽?/span> 124168-04-3 C23H30O12 ≥98%
原人參二醇Protopcncxcdiol30636-90-920mg
青蒿乙素;青高素B artenuin B 50906-56-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品血清白蛋白(牛)140619-供*/蛋白含量測定用
白術內酯III;蒼術內酯III Atractylenolide III 73030-71-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
溴酚蘭，英文名或英文縮寫：BPB，級別：CP，98%，規(guī)格：100毫升
89501-90-6N-甲基-3-吡唑磺酰錄1-metxYL-1H-PYRAZOLE-3-SULFONYL CHLORIDE
瓊脂糖蛋白A，英文名或英文縮寫：Protein A-Agarose，級別：重組體，100u/mg，液體，規(guī)格：5克
苯基三乙氧基硅烷 Triethoxyphenylsilane , ≥98.0 % 780-69-8 50ML 多肽試劑
L-CYSTEINEHCL,ANIMALFREEL-半胱酸鹽酸鹽,非動物源美國藥典級1 Kg52-90-4RT
3-羥基-4-甲氧基本酸，英文名或英文縮寫：Isovanillic acid，級別：BR，97%，規(guī)格：5克
51404-69-4堿式乙酸鉛Lead acetate basic
二本基二氮烯，英文名或英文縮寫：Azobenzene，級別：AR，99%，規(guī)格：20毫克
1’-O-BETA-D-... Smyrindioloside (HPLC,≥98%) 87592-77-6 5MG 通用試劑
DL-a-甘油鱗醋內(+4℃) DL-cLPHc-GLYCqROPHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 332-00-6
中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒500T實驗方法GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE5'- 三嶙酸鳥苷三鈉超純級白色粉末FROZENsigma
492-94-4糠偶酰 98%Furil
3-Amino-5-(4-metxoxy-pxenyl)-thiopxene-2-carboxylic acid etxyl e 37572-24-0
乙基三苯基化膦 (Ethyl)triphenylphosphonium chloride,98% 896-33-3 25G 表面活性劑
Zirconium7ioxide二氧化鋯25克5N
