TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次說(shuō)明書(shū)使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無(wú)水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過(guò)第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過(guò)濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請(qǐng)?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次說(shuō)明書(shū)詳細(xì)說(shuō)明書(shū):
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次說(shuō)明書(shū)確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級(jí)雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會(huì)非特異地吸附探針?lè)肿拥奈稽c(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會(huì)吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤(rùn)。
2. 將濕潤(rùn)的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級(jí)雜交液的比例沿小口 加入超級(jí)雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒(méi)入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長(zhǎng)到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過(guò)程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動(dòng)狀態(tài)中,使超級(jí)雜交液與印跡膜充分接觸。
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次說(shuō)明書(shū)步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測(cè)基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對(duì)于檢測(cè)克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過(guò)程中,一定不要使印跡。
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 ,英文名: Amylin ELISA Kit
人抗sp100抗體(sp100)ELISA檢測(cè)試劑盒Humananti-sp100-antibodyELISAKit 96T/48T
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)免疫試劑盒 Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit
CLIAKitforT3三碘甲狀腺原氨酸(T3)規(guī)格:48T/96T
人體SOCS-3基因甲基化檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitABM-Ab人抗肺泡基底膜抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白5(XRCC5)ELISA試劑盒 ,英文名: XRCC5 ELISA Kit
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA kit
英文名稱RatCCL26ELISAKit大鼠CCL26規(guī)格:96T/48T
口香糖*比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
ELISAKitSRF/IF人皮膚反應(yīng)因子/炎性因子規(guī)格:48T/96T
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human neural cell adhesion molecule ligand 1 (NCAM-L1/CD171) ELISA Kit 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒
humanfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanantimousantibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物葡萄糖磷酸變位酶(phosphoglucomutase;PGM)電泳分析試劑盒5次
Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit人*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Lyso-PAF C-16-d4 (1 mg) 1-O-hexadecyl-(7,7,8,8-d4)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4; Lyso-PAF C-16-d4
UNC3230 (25 mg) 5-[(cyclohexylcarbonyl)amino]-2-(pxenylamino)-4-thiazolecarboxamide
APC-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml APC-streptavidin conjugate 1 mg/ml
CAY10679 (25 mg) 1,1’-(1,8-dioxo-1,8-octanediyl)bis[glycyl-glycine; N,N’-bis(glycyl-glycine)-hexane-1,6-Dicarboxyamide; CAY10679
Linoleic Acid (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid
2-Acetylnaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione; BBI608 Cancer Cell Stemness Inhibitor, BBI608
GLP-1 (7-36) amide (chicken, common turkey)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Ser-Asp-Ile-Thr-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Asn-Gly-Arg-NH2
WWamide-2Trp-Arg-Glu-Met-Ser-Val-Trp-NH2
[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe
Biotin-[Tyr0]-Orexin B, mouse, ratBiotin-Tyr-Arg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Asn-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
Octreotide AcetateD-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-Ol(Disulfide bridge Cys2-Cys7)
TdT 加尾法 DNA 標(biāo)記試劑盒5次說(shuō)明書(shū)三正丙胺TripropylamineCP250mL
CA1351-2.5g低熔點(diǎn)瓊脂糖39346-81-12.5g0
ER0602Pae I2500 units
Plasmid Midi Kit100T
INT500mg