培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96523 |
商品介紹:
名稱 Sf21 (昆蟲卵巢細(xì)胞) 別稱SF21; Sf-21; SF-21; IPLB-SF-21-AE; IPLB-Sf21-AE; IPLB-SF21-AE; IPLB-SF 21AE; IPLB-Sf21AE; IPLB-SF21AE; IPLB-SF-21; IPLB-Sf-21; IPLB-SF 21; IPLB-Sf21; IPLB-SF21 年齡(性別)蛹 組織來源卵巢 生長特性半貼半懸 細(xì)胞形態(tài)圓形 背景描述Sf21細(xì)胞是源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,是Sf9細(xì)胞的克隆系;Sf21細(xì)胞可以用于昆蟲病毒的基礎(chǔ)研究和復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基TNM-FH+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~26-72 hours 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,100%; 溫度:28℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG
Sf21 (昆蟲卵巢細(xì)胞)酸化MRS瓊脂(AMRSA) Acidification MRS Agar 250g 0.156-10 ng/mL 人離子型N-甲基D-天冬谷受體(GRIN1)ELISA試劑盒
SB培養(yǎng)基 SB Medium 250g 31.2-2000 pg/mL 人自身免疫調(diào)節(jié)因子(Autoimmune regulator)ELISA試劑盒
250mL Blocking Reagent with Triton X-100 & Fetal Calf Serum Blocking Reagent with Triton X-100 & Fetal Calf Serum 常溫保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(IV) chain
1瓶 PG-BE1株 PG-BE1 低溫運輸和保存
1g 5- 吡哆醛,一水 Pyridoxal 5-Phosphate, Monohydrate -20℃保存 31.2-2000 pg/mL 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒
果蠅培養(yǎng)基 Drosophila medium 250gTMP瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)TMP Agar 用于菌的分離培養(yǎng)250
50次 加A試劑盒 dA Tailing Kit -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Fibronectin
100mL MES Buffer,0.5M,pH6.0 MES Buffer,0.5M,pH6.0 常溫保存
1瓶 PC-12(未分化)株 PC-12(未分化) 低溫運輸和保存血液增菌培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)Blood Enrichment Medium250克用于血液中致病菌的增菌培養(yǎng)
M17瓊脂 M17 Agar 250g 0.625-40 ng/mL 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒
2 ug pBlueScript SK(+) pBlueScript SK(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Copper-transporting ATPase 1