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培養(yǎng)微生物6大營養(yǎng)來源解讀2023/11/13
微生物不是專用于生物分類學的名詞，而是指一般需借助顯微鏡才能看清的所有微小生物的統(tǒng)稱，數(shù)量龐大且多樣。微生物中的“微”便是它的特點之一，是人眼不能直接看到的，有些微生物只有粉塵那么大，而有些微生物更小...
人彈性蛋白（ELN）檢測試劑盒應用注意事項2023/11/6
人彈性蛋白（ELN）檢測試劑盒應用注意事項：1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀...
科研抗體的制備過程2023/10/30
抗體的制備過程：1.免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其...
小鼠骨髓多能干細胞培養(yǎng)操作2023/10/23
小鼠骨髓多能干細胞培養(yǎng)操作：培養(yǎng)操作：一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基...
多胺氧化酶(PAO)測試盒比色法活性計算2023/10/17
測定原理：PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫，在過氧化物酶存在的條件下與底物顯色，在550nm下有特征吸收峰，通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。PAO活性計算：1、按樣本蛋白濃度計算：單位定義：每m...
培養(yǎng)基?間歇滅菌與連續(xù)滅菌比較2023/10/8
培養(yǎng)基間歇滅菌與連續(xù)滅菌比較:1、歇滅菌的優(yōu)點和缺點優(yōu)點是設(shè)備要求低，不需另外設(shè)置加熱、冷卻裝置；操作要求低，適于手動操作，適合于小批量生產(chǎn)規(guī)模；適合于含有大量固體物質(zhì)的培養(yǎng)基的滅菌。缺點是培養(yǎng)基的營...
原代細胞與傳代細胞培養(yǎng)不同點分析2023/10/5
區(qū)別一：定義不同原代細胞培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。傳代細胞培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)的過程。對單...
擴增曲線的四個時期解釋2023/9/25
擴增曲線是描述PCR動態(tài)進程的曲線，以循環(huán)數(shù)為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。理論上PCR過程中反應產(chǎn)物是以指數(shù)增長的，但隨著PCR循環(huán)數(shù)的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反應結(jié)果無擴增條帶分析2023/9/18
PCR反應結(jié)果無擴增條帶分析:1、酶失活或在反應體系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或運輸不當而失活，往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結(jié)果。2、模板含有雜質(zhì)。特別是對甲醛固定及石蠟包埋...
細胞凍存及復蘇操作步驟2023/9/11
細胞凍存及復蘇操作步驟：一、凍存1、消化細胞，將細胞懸液收集至離心管中。2、1000rpm離心10分鐘，棄上清液。3、沉淀加含保護液的培養(yǎng)，計數(shù)，調(diào)整至5×106/ml左右。4、將懸液分至凍存管中，每...
PCR反應循環(huán)參數(shù)注釋2023/9/8
循環(huán)參數(shù):1.預變性模板DNAwan全變性與PCR酶的wan全激活對PCR能否成功至關(guān)重要，建議加熱時間參考試劑說明書，一般未修飾的Taq酶激活時間為兩分鐘。2.變性步驟循環(huán)中一般95℃，30秒足以使...
單克隆抗體的性質(zhì)鑒定方法2023/8/28
當獲得多個雜交瘤細胞株時，要了解哪一株是zui適用的，則一定要通過各種鑒定。分析常見的方法有：（一）Ig類型測定通常以免抗小鼠Ig類及亞類抗體與培養(yǎng)液中單克隆抗體按雙向瓊脂擴散法進行測定，確定其Ig類...
胎牛血清質(zhì)控外觀判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要。1、顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl，實際上...
大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞操作要點2023/8/17
大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞操作要點：1、將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。2、將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37...
熒光定量PCR擴增曲線四個時期2023/8/7
擴增曲線是描述PCR動態(tài)進程的曲線，以循環(huán)數(shù)為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。理論上PCR過程中反應產(chǎn)物是以指數(shù)增長的，但隨著PCR循環(huán)數(shù)的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
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