細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X9555

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒是一種通過(guò)化學(xué)發(fā)光法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP含量從而來(lái)定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與Promega公司的同類產(chǎn)品基本相同，對(duì)于相同的細(xì)胞樣品本試劑盒的發(fā)光效果更強(qiáng)一些。

本試劑盒比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細(xì)胞活力測(cè)定方法更加簡(jiǎn)單快捷。只需把試劑盒提供的檢測(cè)試劑與培養(yǎng)細(xì)胞等體積混合，反應(yīng)10分鐘后即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。無(wú)需洗滌細(xì)胞，也無(wú)需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定，在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)無(wú)顯著變化，30分鐘內(nèi)的下降不超過(guò)10%。

本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測(cè)，也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測(cè)。

本試劑盒線性范圍廣，檢測(cè)靈敏度高。用96孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，本試劑盒在0-50,000個(gè)細(xì)胞/孔的細(xì)胞密度范圍內(nèi)有良好的檢測(cè)效果，并且在僅有幾百個(gè)細(xì)胞時(shí)仍有良好的線性關(guān)系。當(dāng)細(xì)胞數(shù)量?jī)H為50個(gè)/孔時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度可達(dá)空白孔的5倍左右。

ATP，作為重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過(guò)程中起著重要作用。ATP是細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)重要指標(biāo)，也是具有代謝活性細(xì)胞的重要標(biāo)志性分子，并和活細(xì)胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此，ATP含量能很好地反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目，即本試劑盒可以通過(guò)測(cè)定ATP含量來(lái)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或檢測(cè)細(xì)胞活力。

本試劑盒通過(guò)ATP檢測(cè)細(xì)胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng)，ATP可以通過(guò)測(cè)定化學(xué)發(fā)光來(lái)進(jìn)行定量。由于ATP含量能很好地反映活細(xì)胞的數(shù)目，而ATP含量和發(fā)光強(qiáng)度成正比，這樣就可以簡(jiǎn)單地通過(guò)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度來(lái)計(jì)算出細(xì)胞活力或細(xì)胞數(shù)目。

細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)檢測(cè)ATP的原理圖

對(duì)于96孔板，我們推薦使用100μl細(xì)胞培養(yǎng)液和100μl的檢測(cè)試劑，總體積為200μl，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行100次檢測(cè)。對(duì)于384孔板，我們推薦使用25μl細(xì)胞培養(yǎng)液和25μl的檢測(cè)試劑，總體積為50μl，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行400次檢測(cè)。也可以用其它體積的試劑進(jìn)行檢測(cè)，但細(xì)胞培養(yǎng)液和檢測(cè)試劑體積的比例必須為1:1。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期2年。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號(hào)
細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)	Luminescent Cell Viability Assay Kit	100次\|500次	FS-X9555

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

角蛋白1(KRT1)檢測(cè)試劑盒 forKeratin1(KRT1)

低密度脂蛋白(LDL)檢測(cè)試劑盒 forLowDensityLipoprotein(LDL)

腦啡肽(ENK)檢測(cè)試劑盒 forEnkephalin(ENK)

髓過(guò)氧化物mei(MPO)檢測(cè)試劑盒 forMyeloperoxidase(MPO)

雙特異性磷suanmei1(DUSP1)檢測(cè)試劑盒 forDualSpecificityPhosphatase1(DUSP1)

胃泌su抑制肽(GIP)檢測(cè)試劑盒 forGastricInhibitoryPolypeptide(GIP)

外生骨疣蛋白1(EXT1)檢測(cè)試劑盒 forExostoses1(EXT1)

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta1(TGFb1)

半乳凝su8(GAL8)檢測(cè)試劑盒 forGalectin8(GAL8)

野鼠色基因相關(guān)蛋白(AGRP)檢測(cè)試劑盒 forAgoutiRelatedProtein(AGRP)

SHC-轉(zhuǎn)化蛋白3(SHC3)檢測(cè)試劑盒 forSHC-TransformingProtein3(SHC3)

Kruppel樣因子4(KLF4)檢測(cè)試劑盒 forKruppelLikeFactor4,Gut(KLF4)

貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測(cè)試劑盒 forCatEyeSyndromeChromosomeRegion,Candidate1(CECR1)

軸突蛋白2(NRXN2)檢測(cè)試劑盒 forNeurexin2(NRXN2)

Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測(cè)試劑盒 forCrossLinkedC-TelopeptideOfTypeIIICollagen(CTXIII)

間隙連接蛋白43(CX43)檢測(cè)試劑盒 forConnexin43(CX43)

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒 forTransformingGrowthFactorBeta1(TGFb1)
細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Milrinone

jia溴菲寧標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Mebrofenin

愈創(chuàng)木酚磺suan鉀標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Potassium Guaiacolsulfonate

標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Aztreonam

磺anjia基嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Sulfamerazine

奎寧suan標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Quinic Acid

檸檬suan三丁酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Tributyl Citrate

檸檬suan三乙酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Triethyl Citrate

檸檬suan標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Citric Acid

lv化鎂標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1g 英文名稱：Magnesium Chloride (AS)