Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9559

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒	Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit	10T\|20T\|50T\|100T	FS-X9559

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨suan（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨suan（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨suan有高度親和力，故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨suan與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進行熒光素（EGFP、FITC）標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。與FITC 的綠色熒光信號相比，EGFP 的綠色熒光信號具有信號強，不易淬滅，穩(wěn)定性高等優(yōu)點，故本試劑盒采用EGFP作為熒光標(biāo)記探針。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但對凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細(xì)胞區(qū)分開來。

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

脂聯(lián)su(human adiponectin)elisa檢測試劑盒英文名稱：human adiponectin ELISA Kit，human adiponectin，

巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa檢測試劑盒英文名稱：MCP-1/CCL2 ELISA Kit，MCP-1/CCL2，

白細(xì)胞介su15(IL-15)elisa檢測試劑盒英文名稱：IL-15 ELISA Kit，IL-15，

組蛋白脫乙?；?/span>mei8(HDAC8)elisa檢測試劑盒英文名稱：HDAC8 ELISA Kit，HDAC8，

干擾su誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa檢測試劑盒英文名稱：ITAC/CXCL11 ELISA Kit，ITAC/CXCL11，

非神經(jīng)元性烯chun化mei(NNE)elisa檢測試劑盒英文名稱：NNE ELISA Kit，NNE，

鈣激活中性蛋白mei6(CAPN6)elisa檢測試劑盒英文名稱：CAPN6 ELISA Kit，CAPN6，

對氨基benjiasuan(PABA)elisa檢測試劑盒英文名稱：PABA ELISA Kit，PABA，

登革熱抗體(DF-Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱：DF-Ab ELISA Kit，DF-Ab，

磷suan甘油酯(PC/CPG)elisa檢測試劑盒英文名稱：PC/CPG ELISA Kit，PC/CPG，

促jia狀腺su(TSH)elisa檢測試劑盒英文名稱：TSH ELISA Kit，TSH，

層粘連蛋白β1(LN-β1)elisa檢測試劑盒英文名稱：LN-β1 ELISA Kit，LN-β1，

醛(MGO)elisa檢測試劑盒英文名稱：MGO ELISA Kit，MGO，

白細(xì)胞調(diào)節(jié)su(LR)elisa檢測試劑盒英文名稱：LR ELISA Kit，LR，

白介su23(IL-23)elisa檢測試劑盒英文名稱：IL-23 ELISA Kit，IL-23，

磷脂meiA2(PL-A2)elisa檢測試劑盒英文名稱：PL-A2 ELISA Kit，PL-A2，

可溶性瘦su受體(sLR)elisa檢測試劑盒英文名稱：sLR ELISA Kit，sLR，
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒si可巴比標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Secobarbital CII

磷suan標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1.5ml×3ampules 英文名稱：Phosphoric Acid (AS)

雙丙戊suan鈉標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Divalproex Sodium

溴化標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1g 英文名稱：Sodium Bromide

lv化鈉標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1g 英文名稱：Sodium Chloride (AS)

L-阿拉伯糖chun標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：L-Arabinitol

fujia睪tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Fluoxymesterone CIII

羥考tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Oxycodone CII

羥tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Oxymorphone CII

jia氧fu烷標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1ml 英文名稱：Methoxyflurane

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。