碘化丙啶染液(1mg/ml)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9638

產(chǎn)品介紹:

本品是溶于水的PI儲存液，濃度為1mg/ml，只需用合適的緩沖液稀釋到工作液即可。

碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細(xì)胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基之間實現(xiàn)與DNA結(jié)合。這種結(jié)合沒有或者幾乎無序列傾向性，大約每4-5個DNA堿基對結(jié)合一個染料。PI也能與RNA結(jié)合，需要用核酸酶處理來區(qū)分DNA和RNA染色。水溶液中PI的大激發(fā)/發(fā)射波長是493/636nm。一旦與核酸結(jié)合，熒光信號明顯增強20-30倍，大激發(fā)波長向紅色波段遷移~30-40nm，大發(fā)射波長向藍(lán)色波段遷移~15nm，從而使其大激發(fā)/發(fā)射波長變?yōu)?35/617nm。PI的摩爾吸光系數(shù)相對比較低，但是其具有足夠大的斯托克司頻移來同時檢測核酸DNA和熒光標(biāo)記抗體，只需要使恰當(dāng)?shù)臑V片。PI適用于熒光顯微鏡，共聚焦顯微鏡，流式細(xì)胞儀以及熒光計分析。

PI不能穿透細(xì)胞膜而被排斥在活細(xì)胞外，但是可以穿過破損的細(xì)胞膜而對核染色。利用這一特性，通常與Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活細(xì)胞熒光探針一起使用，同時對活細(xì)胞和死細(xì)胞染色和鑒定，用于細(xì)胞凋亡相關(guān)的研究。也可以用作多重?zé)晒馊旧膹?fù)染劑，兼容于各種細(xì)胞標(biāo)記技術(shù)，包括直接或者間接的熒光抗體檢測，mRNA原位雜交，細(xì)胞結(jié)構(gòu)特異性的熒光探針檢測法以及組織染色。PI的單獨染色也可以進(jìn)行細(xì)胞周期的檢測。

：25535-16-4

分子式：C27H34I2N4

分子量：668.4

純度：≥95% by HPLC

溶解性：溶于水（1mg/ml）

儲存條件：4℃，避光，有效期6個月

中文名稱：碘化丙啶染液(1mg/ml)

英文名稱：Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml)

產(chǎn)品規(guī)格：1ml

貨號：FS-X9638

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

過氧化物mei體增殖物激活受體γ(PPARγ)檢測試劑盒 forPeroxisomeProliferatorActivatedReceptorGamma(PPARg)

GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)檢測試劑盒 forGATABindingProtein5(GATA5)

suan性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒 forFibroblastGrowthFactor1,Acidic(FGF1)

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2(TNFαIP2)檢測試劑盒 forTumorNecrosisFactorAlphaInducedProtein2(TNFaIP2)

雌二chun(E2)檢測試劑盒 forEstradiol(E2)

唾液suan結(jié)合Ig樣凝集su1(SIGLEC1)檢測試劑盒 forSialicAcidBindingIgLikeLectin1(SIGLEC1)

亮氨suan豐富重復(fù)激mei2(LRRK2)檢測試劑盒 forLeucineRichRepeatKinase2(LRRK2)

四旋蛋白2(TSPAN2)檢測試劑盒 forTetraspanin2(TSPAN2)

載脂蛋白C3(APOC3)檢測試劑盒 forApolipoproteinC3(APOC3)

細(xì)胞周期suD3(CCND3)檢測試劑盒 forCyclinD3(CCND3)

免疫球蛋白G1(IgG1)檢測試劑盒 forImmunoglobulinG1(IgG1)

外核suan焦磷suanmei/磷suan二酯mei1(ENPP1)檢測試劑盒 forEctonucleotidePyrophosphatase/Phosphodiesterase1(ENPP1)

全羧mei合成mei(HLCS)檢測試劑盒 forHolocarboxylaseSynthetase(HLCS)

白介su11受體α(IL11Rα)檢測試劑盒 forInterleukin11ReceptorAlpha(IL11Ra)

lv化物細(xì)胞內(nèi)通道蛋白1(CLIC1)檢測試劑盒 forChlorideIntracellularChannelProtein1(CLIC1)

?？康鞍?/span>2(DOK2)檢測試劑盒 forDockingProtein2(DOK2)

糖抗原125(CA125)檢測試劑盒 forCarbohydrateAntigen125(CA125)
碘化丙啶染液(1mg/ml)N-氧化物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:50mg 英文名稱：Codeine N-Oxide CI

油suan油chun酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:0．5ml 英文名稱：Oleyl Oleate

jia基亞芐亞基樟腦標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Methyl Benzylidene Camphor

牡荊su標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：Vitexin

標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Ribavirin

夸標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Quazepam CIV

鹽suanjia基芐肼標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Procarbazine Hydrochloride

鯨蠟chun標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Cetyl Alcohol

多沙zuo嗪相關(guān)雜質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：

lvjiaben噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Diazoxide

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