線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號(hào)	FS-X9743

產(chǎn)品屬性：

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線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)	Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit with JC-1	100T	FS-X9743

產(chǎn)品介紹：

線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1為熒光探針，快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針?？梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí)JC-1為單體，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測指標(biāo)。JC-1單體的大激發(fā)波長為515nm，大發(fā)射波長為529nm;JC-1聚合物的大激發(fā)波長為585nm，大發(fā)射波長為590nm。實(shí)際觀察時(shí)，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。本試劑盒提供了CCCP作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品，本試劑盒共可以檢測100個(gè)樣品;對于12孔中的樣品，本試劑盒共可以檢測200個(gè)樣品。

儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，保質(zhì)期1年

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

可溶性CD80(sCD80/B7-1)英文名：sCD80/B7-1 β1，3半乳糖轉(zhuǎn)移3抗體包裝25g

可溶性CD80(sCD80)英文名：sCD80 紅陰離子交換蛋白1抗體包裝500g

巨細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)英文名：GM-CSF 腦特定蛋白Brn3B抗體包裝5g

巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)英文名：MIP-1α/CCL3 Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g

巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)英文名：MCP-1/CCL2/MCAF 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體包裝25g

巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)英文名：MCP-1/CCL2 腦和急性白血病胞漿蛋白抗體包裝5g

膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)英文名：GDNF 骨髓基質(zhì)干抗原2抗體包裝25g

堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)英文名：FGF9 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體包裝5g

激活A(Activin A)英文名：Activin A 癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體包裝100mg

活化A(Activin-A)英文名：Activin-A 大腦富含鳥苷激相關(guān)蛋白抗體包裝5MG

核心蛋白聚糖(DCN)英文名：DCN 腦富含膜附著信號(hào)蛋白1抗體包裝5g

肝細(xì)胞生長因子受體(c-MET/HGFR)英文名：c-MET/HGFR 卵黃狀黃斑病蛋白3抗體包裝1g

分化簇抗原30配體(CD30L)英文名：CD30L 卵黃狀黃斑病蛋白抗體包裝5g

二肽基肽IV(DPP4/CD26)英文名：DPP4/CD26 卵黃狀黃斑病蛋白4抗體包裝1g

二肽基肽4(DPP4/CD26)英文名：DPP4/CD26 炭疽桿菌菌體蛋白抗體包裝5g

磷化蛋白激B抗體干擾α2(IFNα2)Ki16198 is the methyl ester of Ki16425, which is a LPA antagonist and inhibits L
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)灰葡萄孢 1-甲基-4-甲酸甲酯內(nèi)源性分泌型糖基化終末產(chǎn)物受體

枯草芽孢桿 1-甲基-2-甲酸甲酯內(nèi)脂

蕈狀芽孢桿 1-甲基-3-甲酸甲酯內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白

白地霉 4-羥基-3--5-硝基芐尼克酰-N-甲基轉(zhuǎn)移

尖孢鐮刀 2-甲基-3-乙酰氧基尼克酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化1

發(fā)酵乳桿 (3-氟-4-嗎啉-4-基苯基)氨酸芐酯尼克酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化4

粉紫香蘑 2--6-羥基吡啶黏著斑激

干草鞘氨單胞 2-甲硫基苯酸釀酒酵母抗體

弗吉尼亞鏈霉三(2-吡啶基)鳥氨酰轉(zhuǎn)移

銳頂鐮孢鈮酸銨草酸鹽水合物尿吡啶啉

根瘤 3-吡啶甲酸酐尿蛋白

根瘤 4--1-茚滿酮尿

葡萄座腔 3-咔唑尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移

大腸埃希 4-二氟甲氧基-3-羥基苯甲尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移1

固氮屬 L-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移8

操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。