當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號 | FS-X9650 |
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產(chǎn)品介紹:
Calcein-AM是一種對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,發(fā)綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團(tuán),增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)并發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM細(xì)胞毒性極低,是適合用于活細(xì)胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細(xì)胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。 由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM常常與死細(xì)胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細(xì)胞的細(xì)胞膜,僅能穿過死細(xì)胞膜的無序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI僅對死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。而用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。 本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料,來進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色標(biāo)記,從而進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)體系,單次就200μl細(xì)胞懸液進(jìn)行染色。 注意事項(xiàng) 1)由于Calcein-AM對濕度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必須緊緊密封蓋子。建議根據(jù)單次用量,分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。 2)碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作時一定要注意防護(hù)。若接觸到皮膚,需要立即用自來水清洗。 3)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 儲存條件:-20℃,有效期12個月 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Calcein-AM/PI Double Stain Kit | 500T | FS-X9650 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
丙氨suan/絲氨suan/半胱氨suan/蘇氨suan轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ASCT1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ASCT1 ELISA Kit,ASCT1,
布皮質(zhì)su4(BEST4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:BEST4 ELISA Kit,BEST4,
胞漿磷蛋白1(STMN1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:STMN1 ELISA Kit,STMN1,
半胱氨suan蛋白mei抑制劑4(CST4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CST4 ELISA Kit,CST4,
白介su26(IL26)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IL26 ELISA Kit,IL26,
白介su11(IL11)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IL11 ELISA Kit,IL11,
γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)氨mei5(γGT5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:γGT5 ELISA Kit,γGT5,
X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(Xtrp2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:Xtrp2 ELISA Kit,Xtrp2,
T-框蛋白3(TBX3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TBX3 ELISA Kit,TBX3,
S抗原(SAG)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SAG ELISA Kit,SAG,
骨成型蛋白3(BMP3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:BMP3 ELISA Kit,BMP3,
干擾suα5(IFNα5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IFNα5 ELISA Kit,IFNα5,
孤兒su磷suanmei1(PHOSPHO1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PHOSPHO1 ELISA Kit,PHOSPHO1,
甘露糖受體C2(MRC2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MRC2 ELISA Kit,MRC2,
鈣黏蛋白20(CDH20)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CDH20 ELISA Kit,CDH20,
封閉蛋白3(CLDN3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CLDN3 ELISA Kit,CLDN3,
分層蛋白(SFN)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SFN ELISA Kit,SFN,
Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒美侖孕tong醋suan酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Melengestrol Acetate
美托爾相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
阿替爾標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Atenolol
鹽suan胍法辛標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Guanfacine Hydrochloride
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Guanine
美比達(dá)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Glipizide
葡庚糖suan鈣標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Calcium Gluceptate
阿普zuo侖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Alprazolam CIV
貓爪草提取物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:cards 英文名稱:Powdered Cat’s Claw Extract
阿普zuo侖相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱:Alprazolam Related Compound A
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