產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：H1細胞培養(yǎng)添加劑（配套）    

產(chǎn)品規(guī)格：20ml

貨號：FS-01X9936

保存溫度（℃）：/-20℃

運輸溫度（℃）：/-20℃(干冰)   
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Contactin 2 (CNTN2)接觸蛋白2(CNTN2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Adrenomedullin (ADM)腎上腺髓質(zhì)(ADM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14)絲裂原激活蛋白激14(MAPK14)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein (GHITM)生長誘導跨膜蛋白(GHITM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Contactin 4 (CNTN4)接觸蛋白4(CNTN4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Granzyme K (GZMK)顆粒K(GZMK)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Retinoblastoma Protein 1 (RB1)視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白1(RB1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Chromogranin A (CHGA)嗜鉻蛋白A(CHGA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2)毒蕈堿型受體M2(CHRM2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Bradykinin (BK)緩激(BK)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Fibrinogen Beta (FGb)纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Relaxin (RLN)松弛(RLN)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Abscisic Acid (ABA)脫落(ABA)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)胎盤堿性磷(ALPP)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Contactin Associated Protein Like Protein 4 (CNTNAP4)接觸蛋白關聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Carbohydrate Antigen 50 (CA50)糖抗原50(CA50)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T

 Synuclein Alpha (SNCa)突觸核蛋白α(SNCα)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格：48T/96T
H1細胞培養(yǎng)添加劑（配套）GFOD2  葡萄糖果糖還原2抗體規(guī)格: 0.2ml

GFRAL  膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

GHDC  GHDC蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

GK5/Glycerokinase 5  甘油激5抗體規(guī)格: 0.2ml

GLB1L3  β半乳糖1樣蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

GLCCI1  糖皮質(zhì)誘導轉錄蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

ANGPTL3/ANG5  血管生成樣蛋白3規(guī)格: 0.2ml

GLIPR2  腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml