產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠氣道平滑肌細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：ASMC

貨號(hào)：FS-01X9634

細(xì)胞培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 Human Interleukin-2 receptor，IL-2R ELISA Kit

人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒Human Interferon β，IFN-β/IFNB ELISA Kit

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 Human transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit

人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒Human leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit

人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒 Human growth hormone relasing factor，GH-RF ELISA Kit

人巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒 Human macrophage chemotatic factor，MCF ELISA Kit

人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒 Human Interferon α/βReceptor，IFN-α/βR ELISA Kit

人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒 Human B cell growth protein，BCGF ELISA Kit

人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 Human B cell differetiation factor，BCDF ELISA Kit

人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒 Human soluble adhesion molecules，Sam ELISA Kit

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒Human Perforin/Pore-forming protein，PF/PFP ELISA Kit

人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA試劑盒Human pleiotrophin，PTN ELISA Kit

人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒Human lymphocyte factor ELISA Kit

人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒 Human Cobra venom neuronal protective factor，CVNPF ELISA Kit

人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor，sTNFαR ELISA Kit

人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒Human soluble cytokine receptor，sCKR ELISA Kit

人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒Human colony-stimulating factor，CSF ELISA Kit

人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒Human apoptosis inducing factor，AIF ELISA Kit

人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒Human Placenta Cadherin，P-cad ELISA Kit
小鼠氣道平滑肌細(xì)胞beta-Amyloid(35-42)  β淀粉樣肽/Aβ42抗體 0.1ml

ER α  雌激素受體α抗體 0.1ml

CKLFSF2/CMTM2  趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml

COX7A2  c氧化酶VIIA亞型2抗體 0.1ml

CKLFSF2 isoform 1  趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體 0.2ml

MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml

Streptavidin/SA protein  鏈酶親和素抗體 0.1ml

human Serum IgA  人血清型免疫球蛋白A抗體 0.2ml