當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9624 |
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產(chǎn)品介紹:
本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測,可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。 TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)可以用來檢測組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入FITC-12-dUTP,從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測。 本試劑盒對標(biāo)記反應(yīng)進(jìn)行了優(yōu)化,采用佳比例的FITC-12-dUTP和未標(biāo)記dNTP進(jìn)行3’-OH末端的核苷酸摻入,使得同一個(gè)斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標(biāo)記尾巴"。該“標(biāo)記尾巴"減少了相鄰摻入dNTP上標(biāo)記基團(tuán)的空間位阻,增加每個(gè)斷裂片段上的熒光基團(tuán)數(shù)目,降低熒光基團(tuán)相鄰后可能造成的聚集和淬滅,從而提高檢測靈敏度,減少非特異性反應(yīng)。 試劑盒組份: 5×Equilibration Buffer————750μl FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl Recombinant TdT Enzyme—————20 μl Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl DNase I (1 U/μl)———————5μl 10×DNase I Buffer——————100 μl 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
TUNEL Apoptosis Detection Kit (FITC) | 20T | FS-X9624 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
3-葡萄糖suan孕二chun(PdG)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PdG ELISA Kit,PdG,
二肽基肽meiIV(DPP4/CD26)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DPP4/CD26 ELISA Kit,DPP4/CD26,
白細(xì)胞分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CD40L/TNFSF5 ELISA Kit,CD40L/TNFSF5,
組蛋白脫乙?;?/span>mei2(HDAC2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HDAC2 ELISA Kit,HDAC2,
轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TAGLN ELISA Kit,TAGLN,
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TRAIL ELISA Kit,TRAIL,
脂解激活脂蛋白受體(LSR)elisa檢測試劑盒 英文名稱:LSR ELISA Kit,LSR,
整合suα1(ITGα1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ITGα1 ELISA Kit,ITGα1,
早老su2(PS2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PS2 ELISA Kit,PS2,
單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MCP-4/CCL13 ELISA Kit,MCP-4/CCL13,
不透光相關(guān)蛋白(OPAs)elisa檢測試劑盒 英文名稱:OPAs ELISA Kit,OPAs,
雌三chun(E3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:E3 ELISA Kit,E3,
表皮細(xì)胞活化肽因子(CAPF)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CAPF ELISA Kit,CAPF,
白細(xì)胞彈性蛋白mei(HLE)elisa檢測試劑盒 英文名稱:HLE ELISA Kit,HLE,
白介su1受體相關(guān)激mei1(IRAK1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IRAK1 ELISA Kit,IRAK1,
κB抑制蛋白激mei(IKK)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IKK ELISA Kit,IKK,
β防御su1(DEFB1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DEFB1 ELISA Kit,DEFB1,
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC)羥可待tong標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:5 vials 英文名稱:
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Reserpine
硫利達(dá)嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Thioridazine
benjiasuan雌二chun標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Estradiol Benzoate (AS)
表乳suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Epilactose
相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
硝ben地平亞硝基ben吡啶同系物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
枸櫞suanlvmi芬標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Clomiphene Citrate
沙利度an標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Thalidomide
溴丙an太林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Propantheline Bromide
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