TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 647)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9626

操作步驟：

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	英文名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品貨號
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 647)	TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647)	20 rxn	FS-X9626

產(chǎn)品介紹：

本試劑盒應(yīng)用范圍廣，可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。

細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細胞凋亡檢測試劑盒（Alexa Fluor 647）可以用來檢測組織細胞在凋亡晚期過程中細胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）的作用下，在基因組DNA斷裂時暴露出的3′-羥基（3′-OH）末端摻入Alexa Fluor 647-12-dUTP，從而可以用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。Alexa Fluor 647為紅色熒光染料，具有很高的穩(wěn)定性和很強的亮度。

試劑盒組份：

5×Equilibration Buffer——————————1.25 ml

Alexa Fluor 647-12-dUTP Labeling Mix———100 μl

Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl

Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl

注意事項

1) 需自備用于洗滌細胞的PBS，用于封片的抗熒光淬滅封片液，用于固定的4%多聚。

2) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

鞘磷脂(SM)elisa檢測試劑盒英文名稱：SM ELISA Kit，SM，

葡萄糖激mei調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)elisa檢測試劑盒英文名稱：GKRP ELISA Kit，GKRP，

Ⅷ(FⅧ)elisa檢測試劑盒英文名稱：FⅧ ELISA Kit，F(xiàn)Ⅷ，

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29(ERP29/C12orf8/ERP28)elisa檢測試劑盒英文名稱：ERP29/C12orf8/ERP28 ELISA Kit，ERP29/C12orf8/ERP28，

膜聯(lián)蛋白Ⅰ(ANX-Ⅰ)elisa檢測試劑盒英文名稱：ANX-Ⅰ ELISA Kit，ANX-Ⅰ，

卵泡抑su樣蛋白1(FSTL-1)elisa檢測試劑盒英文名稱：FSTL-1 ELISA Kit，F(xiàn)STL-1，

磷suan化乙酰輔meiA(PaCoA)elisa檢測試劑盒英文名稱：PaCoA ELISA Kit，PaCoA，

類白細胞抗原B27(HLA-B27)elisa檢測試劑盒英文名稱：HLA-B27 ELISA Kit，HLA-B27，

游離三碘jia狀腺原氨suan(Free-T3)elisa檢測試劑盒英文名稱：Free-T3 ELISA Kit，F(xiàn)ree-T3，

胰島su生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)elisa檢測試劑盒英文名稱：IGF-Ⅱ ELISA Kit，IGF-Ⅱ，

異丙(iso-Hyd)elisa檢測試劑盒英文名稱：iso-Hyd ELISA Kit，iso-Hyd，

血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)elisa檢測試劑盒英文名稱：PA-IgM ELISA Kit，PA-IgM，

血紅蛋白α亞基(HB-α)elisa檢測試劑盒英文名稱：HB-α ELISA Kit，HB-α，

血管緊張suⅡ(ANG-Ⅱ)elisa檢測試劑盒英文名稱：ANG-Ⅱ ELISA Kit，ANG-Ⅱ，

鋅指蛋白644(ZNF644)elisa檢測試劑盒英文名稱：ZNF644 ELISA Kit，ZNF644，

纖溶mei原激活劑(PLGA)elisa檢測試劑盒英文名稱：PLGA ELISA Kit，PLGA，

細胞凋亡相關(guān)斑點樣蛋白(PYCARD)elisa檢測試劑盒英文名稱：PYCARD ELISA Kit，PYCARD，
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(Alexa Fluor 647)1,6-脫水吡喃葡萄糖標準品規(guī)格:50mg 英文名稱：1,6-anhydro-D-glucose

四碘熒光su鈉標準品規(guī)格:100mg 英文名稱：Erythrosine Sodium

鹽suan多巴酚丁an標準品規(guī)格:600mg 英文名稱：Dobutamine Hydrochloride

碳suan鈉標準品規(guī)格:1g 英文名稱：

瑞美松龍標準品規(guī)格:100mg 英文名稱：Rimexolone

亞氨基二芐標準品規(guī)格:25mg 英文名稱：Iminodibenzyl

相關(guān)物質(zhì)B標準品規(guī)格:30mg 英文名稱：

大豆su標準品規(guī)格:25mg 英文名稱：Daidzein

刺芒柄花su標準品規(guī)格:50mg 英文名稱：Formononetin

標準品規(guī)格:200mg 英文名稱：Crotamiton