當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(WST-1法)
貨號 | FS-X9577 |
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產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-6 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-6 為關(guān)鍵分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-6 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-6 裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-6熒光檢測試劑盒就是將Caspase-6 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-6 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來,可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。 注意事項(xiàng) 1. Caspase-6 Substrate 避光保存及使用。 2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-6 活化的機(jī)制,這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測Caspase-6 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號通路。 3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因?yàn)镃aspase-6 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測定的RFU 值偏低,可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時(shí)間,如果值還是不高,可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Caspase-6 Fluorescence Metric Assay | 20T|50T|100T | FS-X9577 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Tectonic2蛋白(TCTN2)檢測試劑盒 forTectonic2(TCTN2)
成纖維細(xì)胞生長因子12(FGF12)檢測試劑盒 forFibroblastGrowthFactor12(FGF12)
環(huán)加氧mei1(PTGS1)檢測試劑盒 forProstaglandinEndoperoxideSynthase1(PTGS1)
防御suβ136(DEFβ136)檢測試劑盒 forDefensinBeta136(DEFb136)
催乳su誘導(dǎo)蛋白(PIP)檢測試劑盒 forProlactinInducedProtein(PIP)
中性粒細(xì)胞明膠mei關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)檢測試劑盒 forNeutrophilGelatinaseAssociatedLipocalin(NGAL)
白介su8(IL8)檢測試劑盒 forInterleukin8(IL8)
紡錘體蛋白2B(SPIN2B)檢測試劑盒 forSpindlin2B(SPIN2B)
干擾suγ誘導(dǎo)蛋白30(IFI30)檢測試劑盒 forInterferonGammaInducibleProtein30(IFI30)
N-聚糖mei1(NGLY1)檢測試劑盒 forN-Glycanase1(NGLY1)
氨基己糖meiBβ(HEXβ)檢測試劑盒 forHexosaminidaseBBeta(HEXb)
抵抗su(RETN)檢測試劑盒 forResistin(RETN)
胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein5(IGFBP5)
B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)檢測試劑盒 forB-CellLeukemia/Lymphoma2(Bcl2)
端粒mei關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)檢測試劑盒 forTelomeraseAssociatedProtein1(TEP1)
自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)檢測試劑盒 forAutoimmuneRegulator(AIRE)
雙解絲蛋白1(TWF1)檢測試劑盒 forTwinfilin1(TWF1)
Caspase 6熒光法檢測試劑盒(AFC)呋喃zuotong標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Furazolidone
噴替suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Pentetic Acid
地fu烷相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:0.1ml 英文名稱:
屈螺tong屈螺tong標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Drospirenone
jia酪氨suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Metyrosine
重酒石suanben丙chunan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:
jia磺suan非諾多泮標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Fenoldopam Mesylate
呋喃妥英標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Nitrofurantoin
潑尼卡酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
硝ben地平硝ben吡啶同系物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
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