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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> Caspase 3活性檢測(cè)試劑盒(比色法)
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9628 |
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric | 20T | FS-X9628 |
產(chǎn)品介紹:
Caspase 3,即Cysteine-requiring Aspartate Protease 3,也稱(chēng)CPP32、Yama或apopain,屬于Caspase家族的CED-3亞家族(CED-3 subfamily),系一種在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用的蛋白酶,也是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中研究多的一個(gè)Caspase。 Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,且可以直接特異性剪切多種Caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)、ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)、gelsolin和fodrin等。這些由Caspase 3介導(dǎo)的蛋白剪切是細(xì)胞凋亡分子機(jī)制的重要組成部分。另外,caspase 3在細(xì)胞核凋亡和細(xì)胞起泡(Cell blebbing)過(guò)程中也起到了關(guān)鍵作用,包括染色質(zhì)固縮(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等。 Caspase 3 Assay Kit, Colorimetric是一款簡(jiǎn)單快速檢測(cè)細(xì)胞或組織內(nèi)Casepase 3活性的試劑盒,其檢測(cè)原理是基于Casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收,從而可以通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)檢測(cè)Caspase 3的活性(黃色產(chǎn)物與Caspase 3酶的活性成正比)。 另外,本試劑盒中還提供了Caspase 3催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,以此作為定量caspase 3酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。 試劑盒組份: Lysis Buffer裂解液————8ml Assay Buffer檢測(cè)緩沖液——8ml Ac-DEVD-pNA(2mM)—————200μl pNA(10mM)————————200μl 儲(chǔ)存條件:-20℃ |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
γ-谷氨酰水解mei(γGH)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):γGH ELISA Kit,γGH,
YY1轉(zhuǎn)錄因子(YY1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):YY1 ELISA Kit,YY1,
T-框蛋白6(TBX6)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):TBX6 ELISA Kit,TBX6,
Talpid3蛋白(Talpid3)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):Talpid3 ELISA Kit,Talpid3,
SHC-轉(zhuǎn)化蛋白2(SHC2)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):SHC2 ELISA Kit,SHC2,
RhoGDP解離抑制因子α(ARHGDIα)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):ARHGDIα ELISA Kit,ARHGDIα,
Piccolo蛋白(PCLO)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):PCLO ELISA Kit,PCLO,
甘油激mei5(GK5)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):GK5 ELISA Kit,GK5,
封閉蛋白7(CLDN7)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):CLDN7 ELISA Kit,CLDN7,
鈣黏蛋白24(CDH24)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):CDH24 ELISA Kit,CDH24,
分揀連接蛋白10(SNX10)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):SNX10 ELISA Kit,SNX10,
防御suβ1(DEFβ1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):DEFβ1 ELISA Kit,DEFβ1,
翻譯調(diào)節(jié)腫瘤蛋白1(TPT1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):TPT1 ELISA Kit,TPT1,
耳蝶呤1(O)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):O ELISA Kit,O,
mei1(PON1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):PON1 ELISA Kit,PON1,
低氧上調(diào)節(jié)因子1(HYOU1)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):HYOU1 ELISA Kit,HYOU1,
蛋白二硫鍵異構(gòu)mei(PDI)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱(chēng):PDI ELISA Kit,PDI,
Caspase 3活性檢測(cè)試劑盒(比色法)枸櫞suan奧芬那君標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Orphenadrine Citrate
羥考tong相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱(chēng):
相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):
納tong標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱(chēng):Naloxone
樟腦標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱(chēng):Camphor
福辛普利相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):
利魯zuo相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):Riluzole Related Compound A
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:750mg 英文名稱(chēng):Lactulose
鹽suan二jia雙胍相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱(chēng):
姜黃su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱(chēng):Curcumin
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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