當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管土豆內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
土豆內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10751 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
釀酒酵母培養(yǎng)基: 14葡萄酒用提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法;定期移植法
-1556℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
紫色鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
藤黃微球菌培養(yǎng)基: 471近海細(xì)菌水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 20-25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
嗜冷假單胞菌生長條件: 16℃培養(yǎng)基: 7提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
芽孢桿菌對(duì)500mg/L的甲磺隆有抗性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
大腸埃希菌研究模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
異常畢赤酵母培養(yǎng)基: 436模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1557℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
黑木耳培養(yǎng)基: 14試驗(yàn)栽培提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 23-25 定期移植法
匍枝根霉(黑根霉)生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黃曲霉生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0013利用木材水解液和亞硫廢液酒精。提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
蒼白桿菌在基礎(chǔ)鹽加農(nóng)藥培養(yǎng)基上降解丙草胺,降解率50%模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃
AS3.2913光學(xué)儀器防霉試驗(yàn)菌種。模式菌株: no種屬: Penicillium│chrysogenum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 25-28℃
-1558℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
高麗槐素; 馬卡因IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白介素-12)TRIM32 TRIM32抗體
秦皮苷; 白蠟樹苷IL-12(Interleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人)TRIM31 環(huán)指蛋白HCG1抗體
奇任,奇壬IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白介素-12受體β2抗原TRIM3/RNF22 環(huán)指蛋白22抗體
高良姜素IL-13(Interleukin-13) 白介素13抗原TRIM29/ATDC 共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥D相關(guān)蛋白抗體
比枯枯靈;畢靈堿;荷包牡丹堿IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原TRIM25 雌激素反應(yīng)鋅指蛋白抗體
異槲皮苷IL-15(Interleukin-15) 白介素-15抗原TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體
乙酰紫堇靈; 乙酰紫堇靈堿IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗原TRIM17/RNF16 環(huán)指蛋白16抗體
三葉豆紫檀苷IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白介素-16抗原TRIM11/RNF92 環(huán)指蛋白92抗體
苷IL-17(Interleukin-17) 白介素-17抗原TRIM10/RNF9 環(huán)指蛋白9抗體
去氫二異丁香酚IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人)TRIB3/p65 interacting inhibitor of NF-kappaB 神經(jīng)死亡誘導(dǎo)蛋白激酶抗體
土豆內(nèi)源基因核酸檢測試劑盒EpsilonPolylysine ε-聚賴氨 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Promestriene 普羅雌烯 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Bosentanhydrate 波生坦(水合物) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Bosentanhydrate 波生坦水合(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Fosaprepitantdimeglumine 福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Prasugrel 普拉格雷 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Clonidinehydrochloride 鹽可樂定 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Clonidinehydrochloride 鹽可樂定(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧基雌二醇(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧基雌二醇 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
2-Methoxyestradiol 2-甲氧雌二醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Phenforminhydrochloride 鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Phenforminhydrochloride 鹽乙雙胍/降糖靈/鹽乙福明(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Cefoperazonesodium 頭孢哌鈉 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Cefoperazonesodium 頭孢哌鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
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