當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管PAT基因核酸檢測試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
PAT基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10712 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
DMST3235培養(yǎng)基: 0002模式菌株: no種屬: Pseudomonas│stutzeri提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 30℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1460℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
草青霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黃曲霉生長條件: 28℃培養(yǎng)基: CM0077提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
維氏氣單胞菌共生微生物/魚類腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/半乳糖苷酶模式菌株: no生物樣/黃翅魚腸體內(nèi)容物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃
黑曲霉培養(yǎng)基: 0015模式菌株: no發(fā)霉果皮提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
ATCC13344=JCM1330=DSM20116培養(yǎng)基: 0002模式菌株: yes種屬: Arthrobacter│aurescens提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
類黃假單胞菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1461℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
白色鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
莖點菌屬菌培養(yǎng)基: CM0014模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
擬盤多毛孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
穗霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
大腸埃希氏菌動物疫苗研究模式菌株: no種鴨大腸提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
頂孢霉屬活性物質(zhì),次核苷脫氫酶抑制活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 28C
-1462℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
異綠原A(3,5-二咖啡??鼘帲㏄DGF-A 血小板源性生長因子-1(抗原) 羊抗生長分化因子8/肌肉抑制素IgG
異綠原B(3,4-二咖啡??鼘帲㏄DGF-B 血小板源性生長因子-B(抗原) 抗生長、分化因子9IgG
異綠原C(4,5-二咖啡??鼘帲㏄DGF-R-A 血小板源性生長因子受體-A(抗原) 膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子IgG
1-咖啡??鼘嶱DGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B(抗原) 膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alphaIgG
洋薊素(1,3-二咖啡酰奎寧)PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22多肽 抗人、大、小鼠磷化Rho鳥苷交換因子2IgG
1,5-二咖啡??鼘嶱I3K 磷脂酰肌醇激酶(抗原) 生長分化因子15(巨嗜抑制因子1)IgG
標(biāo)準(zhǔn)品BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(抗原)抗體
鹽巴馬?。S藤素,棕櫚堿)PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤生長因子(多肽抗原) 凝溶膠蛋白IgG
橙皮苷PLGF (Placenta growth factor) 胎盤生長因子(多肽抗原) 慶大霉素IgG
新橙皮苷PLGF (Placenta growth factor fragment)(human) 人胎盤生長因子(多肽抗原) 膠質(zhì)纖維性蛋白IgG
PAT基因核酸檢測試劑盒PamidronateDisodium 帕米磷二鈉 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
PamidronateDisodium 帕米磷二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Gentamicinsulfate 硫慶大霉素 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Gentamicinsulfate 硫慶大霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CefuroximeSodium 頭孢呋辛鈉 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CefuroximeSodium 頭孢呋辛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CeftriaxoneSodium 頭孢曲松鈉 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CeftriaxoneSodium 頭孢曲松鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CeftazidimewithSodiumCarbonate 頭孢他啶(含碳鈉) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CefazolinSodium 頭孢唑啉鈉 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CefazolinSodium 頭孢唑啉鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
PiperacillinSodium 哌拉西林鈉 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
PiperacillinSodium 哌拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CiclopiroxOlamine 環(huán)吡司胺;環(huán)吡胺 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
CiclopiroxOlamine 環(huán)吡司胺;環(huán)吡胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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