Bcl-2抑制劑(ABT-263)-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9653

產(chǎn)品介紹:

Navitoclax，又稱ABT-263，是一種強(qiáng)效的，口服生物活性的Bcl-2蛋白家族抑制劑，作用于Bcl-xL，Bcl-2和Bcl-w，Ki分別為≤0.5 nM，≤1 nM和≤1 nM。Navitoclax對多種細(xì)胞具有抗腫瘤活性，如H146、H82、H889、H1963和H1417等，并引起體內(nèi)腫瘤衰退。而且，Navitoclax可以增強(qiáng)化療藥物的治療效果。

【該產(chǎn)品僅用于科研實驗，不能用于人體】

靶點：Bcl-2

：923564-51-6

分子式：C47H55ClF3N5O6S3

分子量：974.6

外觀：粉末

純度：≥98%

溶解性：易溶于DMSO

儲存條件：-20℃，有效期24個月

中文名稱：Bcl-2抑制劑(ABT-263)

英文名稱：Navitoclax(ABT-263)

產(chǎn)品規(guī)格：5mg

貨號：FS-X9653

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

絲蛋白Cγ(FLNC)elisa檢測試劑盒英文名稱：FLNC ELISA Kit，F(xiàn)LNC，

水通道蛋白7(AQP7)elisa檢測試劑盒英文名稱：AQP7 ELISA Kit，AQP7，

嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1)elisa檢測試劑盒英文名稱：BTN1A1 ELISA Kit，BTN1A1，

造骨細(xì)胞鈣黏蛋白(CDHOB)elisa檢測試劑盒英文名稱：CDHOB ELISA Kit，CDHOB，

原鈣黏su19(PCDH19)elisa檢測試劑盒英文名稱：PCDH19 ELISA Kit，PCDH19，

原肌球調(diào)節(jié)蛋白4(TMOD4)elisa檢測試劑盒英文名稱：TMOD4 ELISA Kit，TMOD4，

異連蛋白β(DTNβ)elisa檢測試劑盒英文名稱：DTNβ ELISA Kit，DTNβ，

胰蛋白(PANCPIN)elisa檢測試劑盒英文名稱：PANCPIN ELISA Kit，PANCPIN，

煙型受體β1(CHRNβ1)elisa檢測試劑盒英文名稱：CHRNβ1 ELISA Kit，CHRNβ1，

血小板反應(yīng)蛋白解整合su金屬肽mei4(ADAMTS4)elisa檢測試劑盒英文名稱：ADAMTS4 ELISA Kit，ADAMTS4，

血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)elisa檢測試劑盒英文名稱：VEGFA ELISA Kit，VEGFA，

興奮性氨基suan轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(EAAT3)elisa檢測試劑盒英文名稱：EAAT3 ELISA Kit，EAAT3，

心肌su(MYOCD)elisa檢測試劑盒英文名稱：MYOCD ELISA Kit，MYOCD，

腺合mei(ADSS)elisa檢測試劑盒英文名稱：ADSS ELISA Kit，ADSS，

CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa檢測試劑盒英文名稱：CXCR4 ELISA Kit，CXCR4，

Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa檢測試劑盒英文名稱：PⅢNT ELISA Kit，PⅢNT，

Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)elisa檢測試劑盒英文名稱：KCNN2 ELISA Kit，KCNN2，
Bcl-2抑制劑(ABT-263)壬benchun醚10標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Nonoxynol 10

馬來suan噻嗎爾標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Timolol Maleate

吲達(dá)帕an標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:250mg 英文名稱：Indapamide

jia羥松標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Medrysone

異fu烷標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1ml 英文名稱：Isoflurane

芐西林茚滿鈉標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:300mg 英文名稱：Carbenicillin Indanyl Sodium

壬benchun醚9標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:0．5ml 英文名稱：Nonoxynol 9

萘磺suan氧芬標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1g 英文名稱：Propoxyphene Napsylate CII

甘油單亞油suan酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Glyceryl Monolinoleate

脫氧升麻烴標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:20mg 英文名稱：23-EPI-26-Deoxyactein

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