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小鼠重組 LIF

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-18 16:31:01瀏覽次數(shù):116次

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產地 國產 加工定制
適用領域 科研 貨號 FS-02X0046
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產品屬于:

產品名稱:小鼠重組 LIF     

英文名稱:LIF MouseRecombinant

貨號:FS-02X0046

規(guī)格:10ug   

98.jpg 

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:

1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。

4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。

5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 Protein Kinase C Zeta (PKCz)蛋白激Cζ(PKCζ)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Interleukin 5 (IL5)白介5(IL5)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4)尼克酰腺二核磷氧化4(NOX4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4)Smad同源物4(Smad4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Chemokine C-C-Motif Receptor 4 (CCR4)趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2)血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg)干擾γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Protein Kinase C Alpha (PKCa)蛋白激Cα(PKCα)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific (DEFa5)防御α5(DEFα5)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Lysozyme (LZM)溶菌(LZM)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 4 (CHRNa4)煙堿型受體α4(CHRNα4)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Formyl Peptide Receptor 2 (FPR2)甲酰受體2(FPR2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)布魯東氏酪激(Btk)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Phosphatidylserine Receptor (PSR)磷脂酰絲受體(PSR)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Wiskott Aldrich Syndrome Protein (WASP)免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白(WASP)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Fibroblast Growth Factor 7 (FGF7)成纖維細胞生長因子7(FGF7)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)環(huán)加氧2(PTGS2)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T

 Activating Transcription Factor 5 (ATF5)轉錄激活因子5(ATF5)檢測試劑盒(聯(lián)免疫吸附試驗法)規(guī)格:48T/96T
小鼠重組 LIF ATG13  自噬相關蛋白13抗體規(guī)格: 0.2ml

APNG/MPG  N-甲基DNA糖基化規(guī)格: 0.2ml

RIMKLA/FAM80A  核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體規(guī)格: 0.2ml

FAM78A/C9orf59  9號染色體開放閱讀框抗體規(guī)格: 0.2ml

FAM78B  FAM78B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FAM76A  FAM76A蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FAM76B  FAM76B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

ENAH/MENA  ENAH蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

 


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