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服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 分類(lèi) | 貨號(hào) |
轉(zhuǎn)基因玉米品系CBH351核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針?lè)?/span> | FS-P10743 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
腸桿菌屬培養(yǎng)基: 141模式菌株: no葉面提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30 定期移植法
-1540℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: 0013美國(guó)通用的活性干酵母菌提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
AS4.364培養(yǎng)基: 12模式菌株: no種屬: Streptomyces│griseoviridans提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
AS1.196致病菌芯片模式菌株: no種屬: Bacillus│cereus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30.0℃
紫紅曲霉培養(yǎng)基: 776模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
ACCC30501=CBS109.07分類(lèi)學(xué)研究。模式菌株: yes種屬: Monascus│purpureus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃
暗黑鏈霉菌培養(yǎng)基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
-1541℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
海洋棒桿菌模式菌株模式菌株: yes海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0223生長(zhǎng)條件: 28℃
假單胞菌 -80℃冰箱凍結(jié)法生長(zhǎng)條件: 37℃提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 33
花生根瘤菌生長(zhǎng)條件: 28℃培養(yǎng)基: 545提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法
炭角菌屬產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì),抗藤黃八疊球菌模式菌株: noPhaeophyscia提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 25C
嗜松青霉生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0015提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
O1群霍亂弧菌培養(yǎng)基: CM0116O1/classical 稻葉(Inaba)提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
-1542℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
龍血素Bphospho-GSK-3 Beta(pSer9) 磷化葡萄糖合成激酶-3β抗原TSPAN5 四分子交聯(lián)體5抗體(四旋蛋白)
原蘇木素B; 原巴西蘇木素phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 磷化葡萄糖合成激酶3α/β抗原TSPAN4 四分子交聯(lián)體4抗體(四旋蛋白)
辛夷脂素GSR/GRase(glutathione reductase) 谷胱甘肽還原酶抗原TSPAN3 四分子交聯(lián)體3抗體(四旋蛋白)
烏藥內(nèi)酯A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病H1N1-M2蛋白多肽TSPAN20/UPIb 四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白)
漆黃素非瑟酮/紫鉚素A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病H1N1-M2蛋白TSPAN2 四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白)
丹皮酚原苷牡丹酚原甙H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN17/FBX23 四分子交聯(lián)體17抗體(四旋蛋白)
苦玄參苷ⅠBH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN16/TM4-B 四分子交聯(lián)體16抗體(四旋蛋白)
蘆薈苷H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原TSPAN15/NET-7 四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白)
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ;蒼術(shù)內(nèi)酯IH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN14 四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白)
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ;蒼術(shù)內(nèi)酯IIH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原TSPAN13/NET-6 四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白)
轉(zhuǎn)基因玉米品系CBH351核酸檢測(cè)試劑盒SaxagliptinHCL 沙格列汀/沙克列汀鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%
EGCG,(-)-Epigallocatechingallate/GreenTeaExtract 表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酯(EGCG95%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DasatinibMonohydrate 達(dá)沙替尼一水合物 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Exemestane(USP) 依西美坦 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Exemestane 依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Amidopyrine/aminopyrine 氨基比林 質(zhì)量規(guī)格:>98%
AngiotensinII 血管緊張素II 質(zhì)量規(guī)格:>98%
VitaminD3 維生素D3((膽骨化醇) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
PazopanibHCl 帕唑帕尼鹽鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Tiotropiumbromideanhydrous 噻托銨 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Formoterolfumarate 富馬福莫特羅(二水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Formoterolfumarate 富馬福莫特羅(無(wú)水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Faropenemsodium 法羅培南(鈉)(2.5水) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Faropenemsodium 法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%
Orlistat(synthesis) 奧利司他 質(zhì)量規(guī)格:>98%
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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