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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>> 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)
活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9661 |
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產(chǎn)品介紹:
保存條件:-20℃冰凍保存一年。 工作原理: 在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來(lái)觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生 與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點(diǎn)部位,可以通過(guò)生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,在 568-574nm 發(fā)射熒光,呈鮮紅色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。 試劑盒內(nèi)容: 1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml 2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl 3.DIG-dUTP(×20)20μl 4.封閉液(Blocking Reagent)4ml 5.生物su化抗抗體(× 100)20μl 6.SABC-CY3(× 100)20μl 7.Proteinase K(×200)50μl 8 抗體稀釋液 4ml |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
20T/100T | FS-X9661 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
肝su結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)檢測(cè)試劑盒 forHeparinBindingEpidermalGrowthFactorLikeGrowthFactor(HBEGF)
10kDa干擾suγ誘導(dǎo)蛋白(IP10)檢測(cè)試劑盒 forInterferonGammaInducedProtein10kDa(IP10)
二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移mei同源物2(DGAT2)檢測(cè)試劑盒 forDiacylglycerol-O-AcyltransferaseHomolog2(DGAT2)
高爾基磷蛋白3(GOLPH3)檢測(cè)試劑盒 forGolgiPhosphoprotein3(GOLPH3)
Gremlin2蛋白(GREM2)檢測(cè)試劑盒 forGremlin2(GREM2)
ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測(cè)試劑盒 forCoagulationFactorXIIIA1Polypeptide(F13A1)
大型中性氨基suan轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(LAT1)檢測(cè)試劑盒 forLargeNeutralAminoAcidTransporter1(LAT1)
補(bǔ)體成分5a(C5a)檢測(cè)試劑盒 forComplementComponent5a(C5a)
賴氨酰氧化mei樣蛋白2(LOXL2)檢測(cè)試劑盒 forLysylOxidaseLikeProtein2(LOXL2)
生長(zhǎng)激su(GH)檢測(cè)試劑盒 forGrowthHormone(GH)
戊糖su(PTD)檢測(cè)試劑盒 forPentosidine(PTD)
輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)檢測(cè)試劑盒 forNeurofilament,LightPolypeptide(NEFL)
焦磷suanmei2(PPA2)檢測(cè)試劑盒 forPyrophosphatase2(PPA2)
B-細(xì)胞激活因子受體(BAFFR)檢測(cè)試劑盒 forB-CellActivationFactorReceptor(BAFFR)
血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測(cè)試劑盒 forSerumAmyloidA(SAA)
白介su8受體α(IL8Rα)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin8ReceptorAlpha(IL8Ra)
二肽基肽mei8(DPP8)檢測(cè)試劑盒 forDipeptidylPeptidase8(DPP8)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)鹽suan阿替卡因標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Articaine Hydrochloride
芐星鄰lv青霉su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Cloxacillin Benzathine
多沙zuo嗪相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Doxazosin Related Compound C
克霉zuo標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Clotrimazole
鹽suan柔紅霉su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Daunorubicin Hydrochloride
鹽suan去乙酰地爾硫卓標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
乙二an四乙suan鈣二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Edetate Calcium Disodium
氨芐標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:400mg 英文名稱:Cephalexin
差向四環(huán)su標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
羅布考標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Probucol
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