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活細(xì)胞染色液(Hoechst 33342)(100×)
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)
貨號(hào) | FS-X9663 |
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操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號(hào) |
100T | FS-X9663 |
產(chǎn)品介紹:
保存條件:-20℃冰凍保存一年。 工作原理: 在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來(lái)觀察細(xì)胞的死亡,其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活 ,細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的 dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位,可以通過(guò)生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后,再結(jié)合鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶(SABC),然后加入顯色底物 DAB 予以顯示。凋亡的細(xì)包核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。 試劑盒內(nèi)容: 1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)5ml 2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)100μl 3.DIG-dUTP(×20)100μl 4.封閉液(Blocking Reagent)20ml 5.生物su化抗抗體(×100)100μl 6.SABC(×100)100μl 7.Proteinase K(×200)250μl 8.抗體稀釋液 20ml |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
輸入蛋白13(IPO13)檢測(cè)試劑盒 forImportin13(IPO13)
基質(zhì)金屬蛋白mei3(MMP3)檢測(cè)試劑盒 forMatrixMetalloproteinase3(MMP3)
尿激mei型纖溶mei原激活因子(uPA)檢測(cè)試劑盒 forPlasminogenActivator,Urokinase(uPA)
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A3(ABCA3)檢測(cè)試劑盒 forATPBindingCassetteTransporterA3(ABCA3)
組織蛋白meiW(CTSW)檢測(cè)試劑盒 forCathepsinW(CTSW)
白介su1受體拮抗劑(IL1RA)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin1ReceptorAntagonist(IL1RA)
黏病毒耐藥蛋白1(MX1)檢測(cè)試劑盒 forMyxovirusResistance1(MX1)
激肽釋放mei13(KLK13)檢測(cè)試劑盒 forKallikrein13(KLK13)
白介su18結(jié)合蛋白(IL18BP)檢測(cè)試劑盒 forInterleukin18BindingProtein(IL18BP)
肝su結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HBEGF)檢測(cè)試劑盒 forHeparinBindingEpidermalGrowthFactorLikeGrowthFactor(HBEGF)
肝脂mei(LIPC)檢測(cè)試劑盒 forLipase,Hepatic(LIPC)
S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)檢測(cè)試劑盒 forS100CalciumBindingProteinA4(S100A4)
鹽皮質(zhì)激su受體(MR)檢測(cè)試劑盒 forMineralocorticoidReceptor(MR)
錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)檢測(cè)試劑盒 forAnkyrinRepeatDomainProtein1(ANKRD1)
胸腺因子(TF)檢測(cè)試劑盒 forThymicFactor(TF)
細(xì)胞周期suE2(CCNE2)檢測(cè)試劑盒 forCyclinE2(CCNE2)
AMPA離子能谷氨suan受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒 forGlutamateReceptor,Ionotropic,AMPA2(GRIA2)
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒V(POD)阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Aspartame
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三碘-N-jia基benjia酰an標(biāo)準(zhǔn)品
規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):
丙二chun二月桂suan酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱(chēng):Propylene Glycol Dilaurate
碘他拉suan標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Iothalamic Acid
莰烯lv噻嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Cyclothiazide (AS)
凱迪恩標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱(chēng):KDN
巴lv芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):Baclofen Related Compound A
二fu尼柳標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱(chēng):Diflunisal
別嘌chun相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱(chēng):
戊suan相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱(chēng):
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