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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光探針法>> 48T 0.1PCR管轉(zhuǎn)基因玉米品系MON810核酸檢測(cè)試劑盒
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
轉(zhuǎn)基因玉米品系MON810核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10734 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:
?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
長柄木霉生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
小鏈霉菌培養(yǎng)基: CM0012模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
白堊色鐮孢生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
栓孔菌培養(yǎng)基: 0017模式菌株: no腐木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
朊病培養(yǎng)基: 0分類學(xué),形態(tài)研究,教學(xué)使用。病料提供形式: 其他模式菌株: no生長條件: 37 其他;
-1520℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
嗜熱脂肪地芽抱桿菌培養(yǎng)基: 859模式菌株: no砂土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 70℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
金黃色葡萄球菌實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性,并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。模式菌株: no小腸提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
GIMSCAU1.053模式菌株: no安全等級(jí): 1種屬: Enterobacter│cloacae龜背竹提供形式: 凍干物研究培養(yǎng)基: 0003
亞美尼亞小脆柄菇培養(yǎng)基: 150模式菌株: yes枯枝落葉層提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 30 定期移植法
鏈格孢生物轉(zhuǎn)化研究模式菌株: no枯葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 26℃
核果果腐擬莖點(diǎn)菌培養(yǎng)基: MEA模式菌株: no葉提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 1生長條件: 25C -80℃冰箱凍結(jié);礦物油法
-1521℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
尖鐮孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 25 定期移植法
蘇云金芽孢桿菌加拿大亞種培養(yǎng)基: 2模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長條件: 30 真空冷凍干燥法;定期移植法
奇異球菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
棗仁皂苷ArhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長因子UFC1 泛素結(jié)合酶UFC1抗體
棗仁皂苷BEGF(Epidermal growth factor)rat 重組表皮生長因子抗原(大鼠)UEVLD/UEV3 泛素結(jié)合酶E2樣蛋白抗體
苷松新酮EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長因子域7抗原UCP-3 線粒體脫偶連蛋白3抗體
白樺脂Egr-1(Early growth response 1) 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗原UCP-2 線粒體脫偶連蛋白2抗體
升麻素苷phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷化eIF-4E(Ser209)抗原UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體
升麻素ELK1 轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗原UCN2/Urotensin II 尾加壓素2抗體
類葉升麻苷;麥角甾苷;毛蕊花糖苷Elastin 彈性蛋白抗原UCHL5IP 泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體
異類葉升麻苷異麥角甾苷ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原UCHL1/PGP9.5 神經(jīng)胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5)
松果菊苷Emp1 (epithelial membrane protein 1) 表皮膜蛋白1抗原UBTD1 泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
5-O-甲基維斯阿米苷sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗內(nèi)膜抗原UBR7/C14orf130 14號(hào)染色體開放閱讀框130抗體
轉(zhuǎn)基因玉米品系MON810核酸檢測(cè)試劑盒Bexarotene 蓓薩羅丁(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
Ketoprofen 洛芬 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
Ketoprofen 洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)
Ketotifenfumarate 富馬替芬 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(N)
Ketotifenfumarate 富馬替芬(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
Ketorolac 咯 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
Leflunomide 來氟米特 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
Leflunomide 來氟米特(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
LevofloxacinHemihidrated 左氧氟沙星 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)
LevofloxacinHemihidrated 左氧氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(LC),*
Lornoxicam 諾昔康 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(N)
Lornoxicam 諾昔康(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
LosartanPotassium 洛沙坦鉀/沙坦鉀 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
LosartanPotassium 洛沙坦鉀/沙坦鉀 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
Masitinib 馬賽替尼 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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