實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

PCR技術的定量原理：
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擴增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
枯草芽孢桿菌枯草亞種生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

酵母菌培養(yǎng)基: 0013葡萄酒酵母提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基: CM0100模型菌株可用于新藥篩選提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 2模式菌株: no生長條件: 37C 定期移植法

蠟蚧輪枝菌生長條件: 26℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no

盧森坦海旋菌海洋石油污染生物修復/生物活性物質篩選模式菌株: no水樣/近海海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃

 -1488℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

枯草芽孢桿菌枯草亞種生長條件: 30℃培養(yǎng)基: 0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

產氨短桿菌生長條件: 30℃培養(yǎng)基: CM0002提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法

青霉屬菌產生真菌素模式菌株: no枯枝枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C

木霉培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

海神鹽單胞菌培養(yǎng)基: 471微生物/耐冷菌水樣/海冰提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

乳乳球菌研究分析模式菌株: no乳汁提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 55生長條件: 37

 -1489℃冰箱凍結；真空冷凍干燥

解脂亞羅酵母生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 0013提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Penicillium chrysogenum Thom模式菌株: 未知

橡膠樹假絲酵母模式菌株模式菌株: yes花提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃

芍藥苷CD146/MCAM  黑色素瘤粘附分子CD146抗原Wnt6  信號通路Wnt6抗體

鼠李糖ANPEN/CD13(Aminopeptidase N)  氨肽酶N抗原WNT5A  信號通路Wnt5a抗體

甜菜堿CD14(cluster of differentiation antigen 14)  CD14/內素受體抗原WNT4  信號通路Wnt4抗體

鹽甜菜堿CD28  CD28抗原Wnt3a  信號通路Wnt3a抗體

甜菊苷CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule)  活化白粘附分子抗原WNT2B  信號通路Wnt2B抗體

天麻素CD177/NB1 peptide  嗜中性粒抗原CD177抗原WNT2  信號通路Wnt2抗體

熊果CD24  CD24抗原Wnt16  信號通路Wnt16抗體

標準品CD2AP (CD2-associated protein)  白分化抗原CD2APWNT12/WNT10B  信號通路WNT10B抗體

熊果苷CD33 peptide(human)  CD33抗原（人）Wnt11  信號通路Wnt11抗體

辛弗林CD33/Siglec-3(mouse ret)  CD33抗原(大、小鼠）WNT10A  信號通路WNT10A抗體
CP4-EPSPS基因核酸檢測試劑盒ClomipramineHCL　鹽米帕明/鹽丙咪嗪（標準品）　質量規(guī)格：>96.0%(GC)

ClopidogrelBisulfate　硫氫吡格雷I型　質量規(guī)格：>96.0%(GC)

ClopidogrelBisulfate　硫氫吡格雷II型(標準品)　質量規(guī)格：>96.0%(GC)

ClopidogrelBisulfate　硫氫吡格雷II型　質量規(guī)格：>96.0%(HPLC)

Nabumetone　萘丁美/萘普　質量規(guī)格：>96.0%(HPLC)

Nabumetone　萘丁美/萘普（標準品）　質量規(guī)格：>96.0%(HPLC)

Darunavir　地瑞拉韋　質量規(guī)格：>96.0%(HPLC)(T)

Methoxydienone　沃氏物　質量規(guī)格：>96.0%(N)

DL-α-Hydroxyglutaricaciddisodiumsalt　DL-α-羥基戊二二鈉　質量規(guī)格：>96.0%(T)

DemecariumBromide　地美胺　質量規(guī)格：>96.0%(T)

Desogestrel　去氧孕烯　質量規(guī)格：>96.0%(T)

Desonide　地索奈德　質量規(guī)格：>96.5%,BR

Gabexatemesylate　甲磺加貝酯　質量規(guī)格：>96.5%，BS

Gabexatemesylate　甲磺加貝酯(標準品)　質量規(guī)格：>96.5%,工業(yè)級

Dexamethasone　地塞米松,氟美松　質量規(guī)格：>97%