Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料-上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

貨號	FS-X9553

中文名稱：Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料

英文名稱：Hoechst 33342

產(chǎn)品規(guī)格：10mg

貨號：FS-X9553

產(chǎn)品介紹:

本Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低。

Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。

Hoechst 33342的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為350nm，大發(fā)射波長為461nm。

Hoechst 33342溶于水，溶解度可達(dá)20mg/ml。用于細(xì)胞核染色時，推薦的Hoechst 33342工作濃度為0.5-10μg/ml。

：23491-52-3

分子式：C27H28N6O·3HCl·3H2O

分子量：615.99

儲存條件：-20℃避光，有效期一年。

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2(SDF2)檢測試劑盒 forStromalCellDerivedFactor2(SDF2)

蛛毒su受體2(LPHN2)檢測試劑盒 forLatrophilin2(LPHN2)

促腎上腺皮質(zhì)激su樣中葉肽(CLIP)檢測試劑盒 forCorticotropinLikeIntermediateLobePeptide(CLIP) 抗核膜糖蛋白210抗體(AGPA)檢測試劑盒 forAnti-Glycoprotein210Antibody(AGPA)

胰島su受體(ISR)檢測試劑盒 forInsulinReceptor(ISR)

鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)檢測試劑盒 forSodium/GlucoseCotransporter1(SGLT1)

整合suβ2(ITGβ2)檢測試劑盒 forIntegrinBeta2(ITGb2)

Toll樣受體4(TLR4)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor4(TLR4)

鳥氨suan脫羧mei抗mei1(OAZ1)檢測試劑盒 forOrnithineDecarboxylaseAntizyme1(OAZ1)

二氫乳清suan脫氫mei(DHODH)檢測試劑盒 forDihydroorotateDehydrogenase(DHODH)

絲氨suan蛋白mei31(PRSS31)檢測試劑盒 forProtease,Serine31(PRSS31)

mei1(PON1)檢測試劑盒 forParaoxonase1(PON1)

性鞘磷脂磷suan二酯mei(Alk-Smase)檢測試劑盒 forAlkalineSphingomyelinase(Alk-Smase)

分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)檢測試劑盒 forSecretedFrizzledRelatedProtein1(SFRP1)

Genethonin1蛋白(GEN1)檢測試劑盒 forGenethonin1(GEN1)

葡萄糖suanmeiβ(GUSβ)檢測試劑盒 forGlucuronidaseBeta(GUSb)

羧肽meiA3(CPA3)檢測試劑盒 forCarboxypeptidaseA3,MastCell(CPA3)
Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料辛伐他標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Simvastatin

lv雷他定標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Loratadine

左旋jia炔諾tong標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:200mg 英文名稱：Levonorgestrel

鹽suan舍曲林外消旋混合物標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：

鹽suan舍曲林標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:100mg 英文名稱：Sertraline Hydrochloride

鹽suan左卡巴斯汀標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:50mg 英文名稱：Levocabastine Hydrochloride

克肟標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:500mg 英文名稱：Cefixime

地尼相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:10mg 英文名稱：

乙suanjia酯標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱：Methyl Acetate

奧利si他相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:25mg 英文名稱：

国产精品成人网站,亚洲欧美精品在线,色一情一乱一伦,又大又紧又粉嫩18P少妇

Hoechst 33342細(xì)胞藍(lán)色熒光染料返回列表頁

儀表網(wǎng)

會員登錄

收藏該商鋪

提示