細胞周期檢測試劑盒-上海撫生實業(yè)有限公司

貨號	FS-X9724

產品屬性：

產品名稱	英文名稱	產品規(guī)格	產品貨號
細胞周期檢測試劑盒		20T\|50T\|100T	FS-X9724

產品介紹：

細胞周期(cell cycle)是指細胞從前一次分裂結束起到下一次分裂結束為止的活動過程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期組成。G1 期：細胞開始RNA和蛋白質的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S 期：DNA 開始合成，這時細胞核內DNA的含量介于G1 期和G2 期之間。當DNA 復制結束成為4倍體時，細胞進入G2 期。G2 期的細胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質，直到進入M 期。因此，單純從DNA含量無法區(qū)分G2 期和M 期。一旦有絲分裂發(fā)生，細胞分裂成兩個細胞，這兩個細胞或者進入下一個細胞周期，或者進入靜止期(G0期)，而G0 期從DNA含量上同樣無法與G1 期區(qū)分。因此，整個復制周期可以描述為G0/G1、S、G2/M 期。通過核酸染料PI標記DNA,并由流式細胞儀進行分析，可以得到細胞各個時期的分布狀態(tài)，計算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在腫瘤病理學研究中，通常以S 期細胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標。

PI 為插入性核酸熒光染料，能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA 雙鏈螺旋的堿基之間與之結合，其結合的量與DNA的含量成正比例關系，用流式細胞儀進行分析，就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態(tài)，從而計算出各個期的百分含量。PI染色后，假設G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M 期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA 復制的S 期細胞的熒光強度為1-2 之間。

細胞周期檢測試劑盒是利用細胞內DNA 能夠和熒光染料結合的特性，細胞各個時期其DNA含量不同從而結合的熒光染料不同，流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣來檢測細胞周期。

儲存條件：-20℃避光保存。

有效期：一年。

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。

9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。

胞內離子通道蛋白1(CLIC1)英文名：CLIC1 粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體包裝500g

胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名：cPLA2 卡爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg

半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名：Gal-3 含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g

半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名：Gal-6S 含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g

半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名：caspase-3 含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g

半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名：Cys-C 鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g

百白破抗體(DPT)英文名：DPT AGXT2L2蛋白抗體包裝25g

白血病抑制因子受體(LIFR)英文名：LIFR β淀粉樣蛋白胞內結構域相關蛋白1抗體包裝5g

白血病抑制因子(LIF)英文名：LIF 錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體包裝1g

白細胞活化黏附因子(ALCAM)英文名：ALCAM 二磷腺苷核糖基轉移3抗體包裝250mg

白三烯E4(LTE4)英文名：LTE4 二磷腺苷核糖基轉移5抗體包裝1g

白三烯D4(LTD4)英文名：LTD4 腺苷單磷脫1抗體包裝5g

白三烯C4(LTC4)英文名：LTC4 紅蛋白Ank1抗體包裝1g

白三烯B4(LTB4)英文名：LTB4 腺苷琥珀裂解抗體包裝100g

白介9(IL-9)英文名：IL-9 α1B糖蛋白抗體包裝25g

血管緊張原抗體骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競爭性的 Aurora kinase 抑制劑，作用于 Aurora A，Aurora B 和 Aurora C，IC50 分別
細胞周期檢測試劑盒土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結合珠蛋白

膠孢二氫獼猴桃內酯結核桿IgG抗體

傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經營養(yǎng)因子

根霉屬的 4-異喹啉解脲脲原體抗體

猴頭 2-甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合樣金屬蛋白12

色褐鏈霉鹽酸去甲林解整合樣金屬蛋白33

*美味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合樣金屬蛋白9

香菇 4，5-二溴-1H-1，2，3-三氮唑金黃色葡萄球腸

魯氏毛霉 1-甲巰基環(huán)基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸A

糾纏青霉 1-羥甲基環(huán)基乙金黃色葡萄球蛋白A

腐皮鐮孢四氟酸亞鐵(II)金葡腸

阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白

淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽含血小板反應蛋白1

玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽含血小板反應蛋白5

乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白

操作步驟：

1、貼壁細胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min，不同的細胞消化時間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。