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產品名稱:SOD超氧化物歧化酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63288
商品介紹:
測定意義 SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。 測定原理: 通過氧化酶反應系統(tǒng)產生超氧陰離子(O2-.),O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑制了甲臜的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
小鼠胰島樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)聯(lián)免疫試劑盒弗雷德里克斯堡假單胞Rap1B (36E1) Rabbit mAb
小鼠白介1α(IL-1α)聯(lián)免疫試劑盒枯草芽胞桿AE1/SLC4A1 (D3X1R) Rabbit mAb
小鼠白介1β(IL-1β)聯(lián)免疫試劑盒芽胞桿Phospho-SirT1 (Ser27) Antibody
小鼠白介1受體拮抗劑(IL-1ra)聯(lián)免疫試劑盒 穴形節(jié)皮PAR-4 Antibody
小鼠瘦(LEP)聯(lián)免疫試劑盒植物乳桿Merlin/Ezrin/Radixin/Moesin (D1P8I) Rabbit mAb
小鼠白血病抑制因子(LIF)聯(lián)免疫試劑盒盤孢屬Phospho-PAR-4 (Thr163) Antibody
小鼠白介2(IL-2)聯(lián)免疫試劑盒冠突曲霉Raf Family Antibody Sampler Kit
小鼠白介4(IL-4)聯(lián)免疫試劑盒沙生梭孢殼Phospho-eEF2 (Thr56) Antibody
小鼠白介6(IL-6)聯(lián)免疫試劑盒葡萄汁有孢漢遜酵母FGF Receptor 2 (D4L2V) Rabbit mAb
小鼠白介24(IL-24)聯(lián)免疫試劑盒牛舌、肝色牛排eEF2 Antibody
小鼠白介10(IL-10)聯(lián)免疫試劑盒白地霉Progesterone Receptor A/B (D8Q2J) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
小鼠白介17(IL-17)聯(lián)免疫試劑盒谷棒桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
小鼠γ干擾(IFN-γ)聯(lián)免疫試劑盒黃桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)聯(lián)免疫試劑盒 腸炎沙門氏Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb
小鼠血管內皮生長因子(VEGF)聯(lián)免疫試劑盒 栗疫Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb
SOD超氧化物歧化酶檢測試劑盒微量法轉化因子樣蛋白4抗體Human ONECUT1 ELISA Kit仙人掌
NADH復合體5抗體Human OPA3 ELISA Kit鹽咪達普利
肌微管1抗體Human OPTN ELISA KitL-絲
髓性白血病蛋白1抗體Human OFD1 ELISA KitN-乙酰-L-半胱
磷化絲裂原活化蛋白激1抗體Human OGT ELISA KitL-甘-甘-纈三肽
組織相容性復合體2抗體Human OIP5 ELISA Kit馬尿-L-丙
磷化雷帕霉靶蛋白抗體Human OLFM1(Olfactomedin-1) ELISA Kit2′-脫氧鳥苷-5′-三磷三鈉鹽
甲基化CpG結合蛋白2抗體Human OL ELISA Kit2-萘-1-磺