公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:CAT過氧化氫酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63290
商品介紹:
測定意義 CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。 測定原理: H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出CAT活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
小鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)試劑盒Anti-NDUFA4L2 Antibody大鼠檸檬合
小鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)試劑盒Anti-NDUFA9 Antibody兔子血小板因子4
小鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)試劑盒Anti-NDUFA4L2 Antibody植物C
小鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒Anti-NDUFA8 Antibody小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6
小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒Anti-NDUFB1 Antibody集落激因子
小鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)試劑盒Anti-NDUFB9 Antibody兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白
小鼠谷轉(zhuǎn)(ALT) 試劑盒Anti-NDUFS5 Antibodyγ干擾誘導(dǎo)單核因子
小鼠神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1/nNOS)試劑盒Anti-NDUFB10 Antibodyα-銀環(huán)蛇
小鼠膽 (CH) 試劑盒Anti-NDUFA9 Antibody小鼠巨噬炎性蛋白1δ
小鼠低密度脂蛋白 (LDL) 試劑盒Anti-NDUFC2 Antibody大鼠L-鼠乳脫氫
小鼠超氧化物歧化1(SOD1)試劑盒Anti-NDUFV3 Antibody大鼠脂酰A合成
小鼠球蛋白G3(IgG3)試劑盒Anti-NECTIN1 Antibody肥胖抑制ELISA試劑盒
小鼠甲胎蛋白(αFP)試劑盒Anti-NDUFV2 Antibody小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒Anti-NECAB3 Antibody兔子中性粒彈性蛋白
小鼠性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)試劑盒Anti-NECTIN2 Antibody蘇云金芽孢桿菌蛋白
CAT過氧化氫酶檢測試劑盒微量法腺苷-5′-三磷二鈉鹽,三水 98%(R)-1-基-8-(二基膦)-1,2,3,4 -四氫 97%Anti-factor VIII/FITC 熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG
三磷脫氧腺苷鈉鹽 98%(1R,2R)-(+)-1,2-二基-1,2-乙二 99%Anti-factor X III /FITC 熒光標(biāo)記ⅩⅢ抗體IgG
三磷脫氧腺苷鈉鹽溶液 dATP,100 mM 溶液, pH 7.0(R,R)-N-(對甲磺?;?-1,2-二基乙二 98%Anti-FADD/FITC 熒光標(biāo)記Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG
胞苷-5'-三磷二鈉鹽(CTP) 95%(1R,2R)-(-)-N,N'-二甲基環(huán)己烷-1,2-二 ≥97.0% (GC)Anti-FADD/FITC 熒光標(biāo)記Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG
腺苷-3',5'-環(huán)磷 99%乙酰酮釕(III) 97%Anti-Phospho-FADD (Ser191) Mouse Specific /FITC 熒光標(biāo)記兔抗小鼠磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體IgG
三磷脫氧胞苷鈉鹽 98%(R,R)-(-)-1,2-雙[(鄰甲氧基基)(基)膦基]乙烷(1,5-環(huán)辛二烯)Anti-Phospho-FGF Receptor 1 (Tyr766) /FITC 熒光標(biāo)記磷化性成纖維生長因子受體1抗體IgG
三磷脫氧鳥苷鈉鹽 98%三乙酰酮銠(III) 97%Anti-P-FADD/FITC 熒光標(biāo)記磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體IgG
2'-脫氧胸苷-5'-三磷三鈉,二水 96%三乙酰酮銠(III) 99.99% metals basisAnti-FAF1/FITC 熒光標(biāo)記Fas相關(guān)1因子抗體IgG