適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
（2）可疑：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi)，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性，否則為陰性。
（3）陰性：標(biāo)本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：黃柏染料法PCR鑒定試劑盒說明書
英文名稱：Cortex phellodendri     
貨號：YSP8702
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
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實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
氯代正己烷 standard for GC, ≥99.5% (GC) 鹽酸左布比卡因鄰苯二酸二辛酯(DOP)Mouse S1PR2(Sphingosine 1-phosphate receptor 2) ELISA Kit

Mouse S1PR3(Sphingosine 1-phosphate receptor 3) ELISA Kit

氯代十二烷 98% 4-氮雜吲哚椰油酰胺基羥磺基甜菜堿Mouse Ncor2(Nuclear receptor corepressor 2) ELISA Kit

Mouse GDF11(Growth/differentiation factor 11) ELISA Kit

1-氯辛烷  99% Boc-5-氨基戊酸椰油酰胺基氧化胺Mouse Fabp5(Fatty acid-binding protein, epidermal) ELISA Kit

Mouse Ncor1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit

1-硫代癸烷 96% 2-酰胺基噻唑水溶性硅油Mouse Defb1(Beta-defensin 1) ELISA Kit

Mouse Crabp2(Cellular retinoic acid-binding protein 2) ELISA Kit

1，10-癸二硫醇 96% 磷酸鉀一水合物異構(gòu)十醇聚氧烯醚1003Mouse Defb2(Beta-defensin 2) ELISA Kit

Mouse Lpl(Lipoprotein lipase) ELISA Kit

1，2-二溴烷 98% 耐曬猩紅RC壬基酚聚氧烯醚NP-10Mouse Tac1(Protachykinin-1) ELISA Kit

Mouse Hmgb1(High mobility group protein B1) ELISA Kit

1,3-二溴烷 98% 九氟戊酸異構(gòu)十三醇聚氧烯醚1307Mouse ADIPOR1(Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit

Mouse Aph1a(Gamma-secretase subunit APH-1A) ELISA Kit

正十二硫醇 98% D-谷氨酸二酯鹽酸鹽十二烷基苯磺酸Mouse Reg3β(RegeneRating islet-derived protein 3-beta) ELISA Kit

Mouse Ahsp(Alpha-hemoglobin-stabilizing protein) ELISA Kit

1,4-二溴烷 98% 2-溴-5-氯苯酸酯椰子油脂肪酸Mouse MUC1(Mucin-1) ELISA Kit

Mouse Pde5a(cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase) ELISA Kit

1,6-二溴己烷 97% N,N-二異基酰胺溴酸東莨菪堿原粉Mouse Ghrh(Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit

Mouse Sfrp2(Secreted frizzled-related protein 2) ELISA Kit
黃柏染料法PCR鑒定試劑盒說明書 馬來酸溴苯那敏異氏劑標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=5%（?。┤饨喝鉁囵B(yǎng)基293/hTLR5

 氯硝柳胺a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%,基體:苯疊氮鈉葡萄糖肉湯293/m

 氯硝柳胺醇胺鹽 a-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=5%基紫疊氮鈉肉湯293/mNOD2

 茶堿酸β-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%KF鏈球菌瓊脂293/mTLR1

 鹽酸度洛西汀β-硫丹標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=5%CIN-1培養(yǎng)基基礎(chǔ)293/mTLR2

 2,3-二巰基磺酸鈉(一水)硫丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%（?。└牧糦培養(yǎng)基293/mTLR3

 羥茶堿硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%（?。└牧剂姿猁}緩沖液PSB293/mTLR4

 鹽酸氯芬酯硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=3%（?。I養(yǎng)肉湯（NB）293/mTLR5

茶苯海明酮中嘧硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%營養(yǎng)瓊脂（NA）293/mTLR6

 洛緦酮中嘧硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=2%改良番茄汁培養(yǎng)基293/mTLR9 
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論